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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1-1000
- 供应商:
江苏科晶生物科技有限公司
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥950.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1650.0 |
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文献和实验序列的蛋白是让目标载体编码前导序列。否则你将不得不利用好限制性内切酶将前导序列亚克隆到Entry载体中。 我能用什么限制性内切酶将我的目标载体线性化? 可以使用能在GATEWAY盒中切割的酶,但要注意避开ccdB基因。所用的GIBCOBRLTM目标载体都是以线性状态提供的。当没有合适的单切点的酶切位点可以利用或不确定时,可以用拓扑异构酶简单处理以线性化DNA分子(参见说明书中的改进方法)。 用于GATEWAY反应的DNA必须什么样的纯度?
组DNA根据研究目的,研究者需要选择合适的载体。不同的载体对基因组DNA的长度有不同的要求,必须选择合适长度的基因组DNA来构建基因组文库。比如,对于黏粒载体,合适的片段长度大约为40kb;对于BAC载体,合适的片段长度平均为120kb-300kb。构建黏粒基因组DNA文库,需要将基因组DNA用注射器抽打来随机剪切DNA;接着用末端修复酶修复DNA,可以提高DNA连接入载体的效率;然后通过脉冲场电泳或者普通电泳来找到40kb左右的DNA片段,随后使用胶回收试剂盒回收DNA。构建BAC基因组DNA文库,需要
的pIndigoBAC-5、pCC1BACTM),平均来说,合适的片段长度为120kb-300kb。 构建黏粒基因组DNA文库,研究者需要将基因组DNA用注射器抽打来随机剪切DNA;接着用末端修复酶修复DNA,可以提高DNA连接入载体的效率;然后通过脉冲场电泳或者普通电泳来找到40kb左右的DNA片段,随后使用Epicentre GELase 胶回收试剂盒回收DNA。 构建BAC基因组DNA文库,研究者需要将基因组DNA用限制性内切酶(常用EcoR I、BamH I或者Hind III
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