BN-Thiol S-SH, 1000 nm, 10 mg/

PCR产物克隆(10)

3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物，不需将PCR产物进行优化，不需把PCR产物做平端处理（Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆）。不需在PCR扩增产物上加接头，即可直接进行克隆。图32 The TA Cloning® ConceptTopo TA克隆方法（Topo TA Cloning Kit）Topo TA克隆原理与TA克隆一样，唯一不同的是TA克隆用的是T

这种阴选方法快速简单，10 分钟得到想要的活性细胞！

(hematopoietic stem cells) 和CD279 (PD-1)。 · 将孵育好的样品加入到 1 ml 的 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析柱上（柱子最大结合能力：1 x 108个细胞）。 · 当样品完全进入柱子后，加入 10 ml Buffer洗脱两次，就可以得到未结合的细胞了。后续使用流式细胞术检测富集的 NK 细胞。 （此处用到的试剂见文末） 结果与讨论 通过使用阴选将非目的细胞去除后，获得了高纯度的目的细胞群。实验用到了 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析

TOP10 chemically competent cells

or 10-5 μg/μl This can be made by diluting 1 μl of NEB pUC19 plasmid (1 μg/μl, NEB part number N3401S) into 100 ml of TE Hold on ice 0.5 hours Heat shock 60 sec at 42C Add 250 μl SOC Incubate at 37 C for 1 hour