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- 快速定点插入的转基因小鼠服务
- 2025年07月12日
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- 文献和实验
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- 服务名称：
快速、特异位点、单拷贝插入的转基因技术服务
采用我们最新研发的TARGATT TM系统，可以将一个目的基因特异的插入小鼠基因组中一个特定的适宜位点，经过遗传修饰的该位点已被证实为基因转录的活性位点，且能确保外源插入基因在小鼠体内高效表达。该系统可用于组织特异性和非特异性等的基因表达。我们的技术是美国斯坦福大学的专利，成果发表在2011年PNAS杂志上。
| TARGATTTM系统 | 传统转基因方法 | |
| 特异位点插入 | 可以 | 不可以 |
| 转基因表达 | 可以 | 可变或无 |
| 稳定表达 | 可以 | 可变或无 |
| 转基因插入数 | 单个 | 多个 |
| 完成周期 | 3个月 | 6个月 |
| 从DNA到小鼠的价格 | 询价 | ＞$15000 |
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文献和实验方法： 图 1. CKO 正确重组双臂 PCR 鉴定示意图 如图 1 所示，F1 与 R2 为目的位点臂外引物，只有 Donor 正确重组入靶位点，双臂 PCR（5’arm 和 3’arm）才能扩增出预期条带，进而判断模型为正确重组模型。 TIPS 由于 KO（基因敲除）或 TG（转基因）小鼠模型鉴定较为简单，本文只讨论模型制作时带有重组 Donor 的小鼠模型的鉴定方法。 但双臂 PCR 鉴定存在一定的缺陷： 无法鉴定模型是否有随机插入。F1 与 R2为目的位点臂外引物，无法鉴定出未在目的
转基因生物的等位基因分型。（A）可用针对目标区域的特异性PCR引物来检测基因位点是野生型序列（深灰色）还是转基因序列（黄色）。（B）如该凝胶照片所示，PCR 产物可用于确定基因型。在这些实验中，使用了野生型 (+/+)和转基因 (+/–和–/–) 小鼠的基因组 DNA。 但是如果为了检测特定核苷酸突变，则必须对扩增的序列进行进一步分析。例如， PCR 扩增子测序就是研究单核苷酸变异（SNVs）和单核苷酸多态性（SNP）的方法之一。强烈推荐使用高保真 DNA 聚合酶，以防止在 PCR 过程中引入多余
高通量、低成本SNP、突变或甲基化检测方法—HRM 技术应用
HRM 介绍 HRM 技术是high-resolution melting analysis 即高分辨熔解曲线分析技术，是近年国外兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。基于高效稳健的PCR 技术，HRM 不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在PCR 结束后直接运行高分辨熔解，即可完成对样品突变、单核苷酸多态性-SNP、甲基化、HLA 配型等的分析。 因操作简便快速，使用成本低，结果准确，实现了真正的闭管操作，HRM 技术受到普遍关注。 HRM 原理 HRM
