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Escherichia coli大肠杆菌通用探针法荧光定量P

CR试剂盒
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  • ¥4498
  • HZbscience
  • 中国/德国
  • HZ15-63900
  • 2025年07月16日
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      ‘-20℃保存

    • 保质期

      有效期一年

    • 库存

      30

    • 供应商

      上海沪震实业有限公司

    • 规格

      50次

    产品细节图片1

    PCR试剂盒具有下列特点:
    1. 一管式操作,用户只需要提供样品即可。
    2. 根据PCR基因保守区域设计引物,能专一性地检测出猪的成分,但不能检测其他非猪类动物成分(如鸡、牛、羊等)。
    3. 快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为 2.0 小时。
    4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪,无需配置贵重仪器设备。
    5. 对混合样品中猪成分的检测下限为 0.1%,对样品中猪成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL
    6. 本只能用于科研,足够 50 40uL 体系的常规 PCR

    设计PCR用引物时的注意事项?
    可以从以下几个方面考虑。
    1. 引物长度通常为2025 mer。但进行LA PCR时,引物长度应增长为3035 mer
    2. 二条引物之间不能进行Annealing,对3′端的3个碱基需特别注意。
    3. GC含量在5060%,避开局部富含GCAT,为了使引物和模板稳定结合,3′端应避开AT rich结构。
    4. 避开引物自身形成二级结构。
    5. 选择Tm温度相互接近的二条引物。

    PCR用引物的Tm值的计算方法?
    引物为20 mer以下时:
    Tm = 2℃×(A+T) + 4℃×(G+C)
    引物为20 mer以上时:
    Tm = 81.5 + 0.41×(GC%) - 600/L
    其中L为引物的长度。
    PCR反应过程中选择Annealing温度时,一般为 (Tm - 5)℃。

    PCR用引物中含有Inosine (次黄苷) 碱基,其Tm值怎样计算?
    可以不考虑Inosine碱基,使用AGCT计算Tm值就可以。

    PCR用引物的使用量?
    合适的终浓度可在0.1 μM1.0 μM之间选择。引物的浓度太低时,有时扩增产物太少;引物浓度太高时,比较容易出现非特异性扩增反应。通常模板DNA的量较多或High complexity DNA (例如Human genome DNA) 作模板时,引物浓度应低一些;当模板DNA的量较少或Low complexity DNA (例如Plasmid) 作模板时,引物浓度应高一些。
     

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