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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
‘-20℃保存
- 保质期:
有效期一年
- 库存:
30
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
50次
PCR试剂盒具有下列特点:
1. 一管式操作,用户只需要提供样品即可。
2. 根据PCR基因保守区域设计引物,能专一性地检测出猪的成分,但不能检测其他非猪类动物成分(如鸡、牛、羊等)。
3. 快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为 2.0 小时。
4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪,无需配置贵重仪器设备。
5. 对混合样品中猪成分的检测下限为 0.1%,对样品中猪成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。
6. 本只能用于科研,足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。
设计PCR用引物时的注意事项?
可以从以下几个方面考虑。
1. 引物长度通常为20~25 mer。但进行LA PCR时,引物长度应增长为30~35 mer。
2. 二条引物之间不能进行Annealing,对3′端的3个碱基需特别注意。
3. GC含量在50~60%,避开局部富含GC或AT,为了使引物和模板稳定结合,3′端应避开AT rich结构。
4. 避开引物自身形成二级结构。
5. 选择Tm温度相互接近的二条引物。
PCR用引物的Tm值的计算方法?
引物为20 mer以下时:
Tm = 2℃×(A+T) + 4℃×(G+C)
引物为20 mer以上时:
Tm = 81.5 + 0.41×(GC%) - 600/L
其中L为引物的长度。
在PCR反应过程中选择Annealing温度时,一般为 (Tm - 5)℃。
PCR用引物中含有Inosine (次黄苷) 碱基,其Tm值怎样计算?
可以不考虑Inosine碱基,使用A、G、C、T计算Tm值就可以。
PCR用引物的使用量?
合适的终浓度可在0.1 μM~1.0 μM之间选择。引物的浓度太低时,有时扩增产物太少;引物浓度太高时,比较容易出现非特异性扩增反应。通常模板DNA的量较多或High complexity DNA (例如Human genome DNA) 作模板时,引物浓度应低一些;当模板DNA的量较少或Low complexity DNA (例如Plasmid等) 作模板时,引物浓度应高一些。
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文献和实验随着表观遗传学研究的不断深入,组蛋白修饰(甲基化,乙酰化,磷酸化…)和 DNA 甲基化修饰相关的高水平研究成果如雨后春笋般涌现,遍布 Nature, Cell 和 Science 等期刊杂志。在分子生物学的中心法则中,遗传信息从 DNA、RNA 流向蛋白。基因组 DNA 和组蛋白上都存在可逆的表观遗传学修饰,这些修饰可调控基因的表达,并由此决定细胞的状态,影响细胞的分化和发育。不禁让人疑问,那么 RNA 上也存在类似的调控机制吗? 近两年,科学家们首次发现了一种可逆性的 RNA 甲基化—m6A
最近小编读到一篇关于 m6A 修饰的文章,完全被震撼和折服了!!思路之清晰、手段之全面、机制之详尽,让小编甘愿奉上自己的膝盖……毫不夸张的说够得上 Cell 级别(但是为什么没发 Cell 呢?),其他生物学过程/领域完全或部分套用这篇文章的思路,10 +文章妥妥的!!强烈建议收藏!!长文预警!!研究背景和待解决的科学问题癌细胞的转移是癌症致死的最主要原因,超过 90% 的癌症死亡与转移有关。EMT(上皮细胞-间质细胞转化)则是癌细胞转移过程中极其重要的一个步骤:上皮细胞在变成间充
RNA 甲基化 m6A 是如今的研究热点之一,目前主要的研究思路包括差异表达的 write,reader 和 eraser 基因分析;m6A 抗体检测全转录组甲基化水平;分析 m6A甲基化水平变化的靶基因和下游机制研究。而在 7 月 25 日的 Cell 上新发表了一篇介绍不使用 m6A 抗体的检测 mRNA m6A 水平的 Resource 文章,小编第一时间和大家分享一下。作者开发这一方法的前提是有研究报道了 MazF 能特异性的识别无修饰的 ACA 序列并发挥 RNA 酶活性在 ACA
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