ALLEVI 公司代理，生物打印 光敏水凝胶，甲基丙烯酸酯化

甲基丙烯酸明胶（冻干）

明胶甲基丙烯酸酯基凝胶由胶原变性组成，当与光引发剂如LAP混合时，该胶原被光固化成交联。这种一流的产品，允许细胞与基质生物墨水混合，该基质在打印期间在光照时共价交联。

 

图1：生物打印的明胶甲基丙烯酸酯中包裹的人类新生儿真皮成纤维细胞的活/死图像
基于明胶的甲基丙烯酸酯化明胶水凝胶（GelMA），可在LAP和ALLEVI蓝光技术的作用下反应并交联（，）。
以下用户说明中提供的推荐方法，可以流畅的可打印生物材料，可创建负载细胞的3D打印结构。同时，用户可以根据自己的需要进行修改。
储存和操作
GelMA应储存在-20°C。LAP应在干燥环境中避光保存。

你会需要

• 金属或紫外线针头
• 用于打印的培养皿或孔板
• 无菌过滤器
• 可选：处理过的玻璃（参见操作说明）
• 注意：您可以从我们购买GelMA和LAP，包含的针头，过滤器和注射器。

使用说明

1. 测量0.5％w / v LAP浓度并在60℃下在细胞培养基或PBS中混合。混合直至所有LAP溶解。
2. 测量10％w / v GelMA浓度并加入步骤1的溶液中。在60℃下混合直至所有GelMA溶解。
3. 将溶液从步骤2加热至60°C，并在无菌条件下使用0.45μm注射器过滤器过滤。*
4. 将溶液冷却至37℃，然后在无菌容器中混合所需的细胞浓度。*
5. 将载有细胞的生物墨水装入37℃的10ml无菌鲁尔锁注射器中。在冰上冷却直至生物墨水达到室温，约8分钟。
   1. （**关键步骤：GelMA可能需要一段时间才能冷却至室温。在加载前冷却冰上材料非常重要，以加快此过程。）
6. 将注射器装入Allevi打印机。
7. 通过Repetier Host准备设计文件，然后将切片的gcode文件上传到Allevi软件。

*对于没有细胞的打印，可以跳过步骤3和4。

打印设置

速度（mm / s）	层高（mm）	喷嘴直径（mm）	规格	压力（psi）	打印温度（℃）
4	0.3	0.3	27G锥形	10-12	25
*关键步骤：您的针可能会对打印设置产生重大影响。请务必使用建议的针型或重新打印参数。
打印过程中的交联			打印后交联
图层	强度（mW / cm ^ 2）	时间	强度（mW / cm ^ 2）	时间
2	10	10	10	120
用于打印的交联参数，具有建议的GelMA和LAP浓度。

注意事项

1. 凝胶时间和凝胶硬度,可通过改变GelMA或LAP的浓度来调节.如需帮助调整打印参数，请联系我们。
2. 填充量变化超过2毫升可能会影响压力设置。
3. 较大的针头尺寸或锥形规格将需要较低的压力，而较小的针头尺寸将需要较高的压力用于挤压。降低针头尺寸通常也会提高分辨率

参考文献
[1] D. B. Kolesky et al, “3D Bioprinting of Vascularized, Heterogeneous Cell-laden Tissue Constructs,” Adv. Mater., vol. 26, pp. 3124-3130, 2014.
[2] B. D. Fairbanks et. al, “” Biomaterials, vol. 30, no. 35, pp. 6702-6707, Dec 2009.