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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
294
- 英文名:
RNA Purification Kit
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
RT(15-25℃)可
- 规格:
20次
特别提示:包括RNA纯化试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:RNA纯化试剂盒
英文名称:RNA Purification Kit
产品货号:WH0053
产品规格:20次
本试剂盒用于从酶反应液(如DNase处理、蛋白酶处理、RNA标记等)中纯化回收RNA,也可用于从其它方式提取获得的RNA的纯化。纯化的总RNA无蛋白质污染,所得的RNA可用于Northern Blot、Dot Blot、mRNA提取、cDNA合成、引物延伸、差异显示等。
本试剂盒使用独特的离心吸附柱,在高盐条件下RNA与硅胶吸附膜高效、专一地结合,同时zuì大限度除去蛋白质、无机盐离子和许多有机杂质等,在低盐条件下,RNA被洗脱。可处理的RNA样品量为20μg。
操作流程:
试剂盒组成:
| 组分 | 50T |
| 溶液RK | 10ml |
| 漂洗液RW | 12ml |
| RNase-Free ddH2O | 15ml |
| RNase-Free吸附柱CR2(含2ml收集管) | 20套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 20个 |
保存条件:室温(15-25℃)可保存1年。
预防RNase污染,应注意以下几方面:
1.经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。
2.使用RNase-Free的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3.RNA在本制品中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用RNase-Free的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4h,塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10min,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4.配制溶液应使用RNase-Free ddH2O。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(V/V,放置过夜,高压灭菌)。
操作步骤:
第一次使用前在RK中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1ml RK中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液zuì好现用现配。配好的RK 4℃可放置一个月,溶液RK在储存时可能会形成沉淀,如果有沉淀出现,请加热溶解后使用。
第一次使用前应在漂洗液RW中加入无水乙醇,加入量请参见瓶上标签。
以下步骤建议在冰浴中进行。
1.在RNA样品中加入RNase-Free水补足至100 μl,加入350 μl溶液RK(使用前请先检查是否已加入β-巯基乙醇),充分混匀。
2.加入250 μl无水乙醇,充分混匀,立即进行下一步。
3.将上一步所得溶液和沉淀一起转入吸附柱CR2中,12000rpm离心30 sec,弃掉收集管中的废液。
4.向吸附柱CR2中加入500 μl漂洗液RW(请先检查是否已加入乙醇),室温放置2 min后,12000rpm离心30 sec,弃废液,将CR2放入收集管中。
5.重复操作步骤4。
6.12000rpm离心5 min,去除残余液体。
7.将吸附柱CR2转入一个新离心管中,加14-20 μl RNase-Free水,室温放置2 min后,12000rpm离心2 min。
洗脱缓冲液体积不应少于14 μl,体积过小影响回收效率。
洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且RNA产物应保存在-20℃,以防RNA降解。
8.要提高RNA得率,可重复上步操作一次,合并两次得到的溶液。
我公司销售的RNA纯化试剂盒,RNA Purification Kit质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验,或者用RNase-Free的DNase处理RNA样品。在这里我们介绍一些常用的RNA纯化试剂盒,特别是由Affymetrix公司推荐的QIAGEN RNA纯化系列。* RNeasy Protect Kit:一旦生物样品被收集分离,它的RNA会立刻变得非常不稳定,极易被降解。由于特异及非特异的RNA降解,或者由于应激反应产生新的RNA都会引起RNA状态的改变。对于生物芯片、基因表达矩阵分析(Array Analysis)、定量RT-PCR等实验来说,采样后立即稳定样品里的RNA以保存当时RNA的表达状态,是精确
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