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pfu DNA Polymerase
一年
北京百奥莱博科技有限公司
-20℃
100U(40μl)|5×100U(5×40μl)
特别提示:包括高保真平末端pfu DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
成分 | 20μl反应体系 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
Template | 0.04-0.2 μg | 0.1-0.5 μg | as you wish |
Primer 1(10μM) | 0.4μl | 1μl | 0.2μM |
Primer 2(10μM) | 0.4μl | 1μl | 0.2μM |
10×pfu PCR buffer(含Mg2+) | 2μl | 5μl | 1× |
dNTP Mixture(10 mM) | 0.4μl | 1μl | 200μM each |
pfu (2.5 U/μl) | 0.4μl | 1μl | 0.05U/μl |
ddH2O | up to 20μl | up to 50μl | - |
PCR反应体系中Mg2+终浓度 | 2 mM | 2.5 mM | 3 mM | 4 mM |
20μl反应体系中25 mM MgSO4加入量 | 0μl | 0.4μl | 0.8μl | 1.6μl |
50μl反应体系中25 mM MgSO4加入量 | 0μl | 1μl | 2μl | 4μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
初始变性 | 94℃ | 3-5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
退火 | 50-60℃* | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 0.5kb/min* | |
最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
组份 | 500 U | 2500U |
BaldStar DNA Polymerase,5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
5×BaldStar PCR Buffer | 1.9ml | 5×1.9ml |
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
5×BaldStar PCR Buffer | 10μl | 1× |
dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
BaldStar DNA Polymerase,5 U/μl | 0.5μl | 2.5 U/50μl |
ddH2O | up to 50μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 10 min | |
变性 | 95℃ | 30 s | 30-40个循环 |
退火 | 55-65℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 60 s | |
终延伸 | 72℃ | 5 min |
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