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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
96
- 英文名:
5×Proteinase K
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
- 规格:
40μl
特别提示:包括50×蛋白酶K在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:50×蛋白酶K
英文名称:5×Proteinase K
产品货号:KFS242
产品规格:40μl
Proteinase K,中文名为蛋白酶K。不含DNase,不含RNase,进口分装,可直接使用。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验,例如基因组DNA 抽提、酶的消化去除等。
酶活力>30U/mg。在37℃,以血红蛋白为底物,1 分钟内可以产生相当于1 微摩尔酪氨酸Folin 阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶K 的量,定义为一个单位蛋白酶K 酶活力。
在很宽的pH 范围内有效,有效的pH 范围为pH4.0-12.5,zuì佳pH 范围为pH7.5-8.0。
蛋白酶K 的zuì佳反应温度为65℃,但在65℃或更高的温度蛋白酶K 自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55℃。
在0.2-1%SDS 或约10mM 尿素存在的情况下,蛋白酶K 显示更高的酶活性。蛋白酶K 的常用工作浓度为0.05-1mg/ml,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH 是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。
常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween-20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K 的活力影响不大。
我公司销售的50×蛋白酶K,5×Proteinase K质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验%,70%,50%,30%各5min。入PBS(含5mmol/l MgCl 2 ,pH7.3~7.4)10min×2。入0.2n HCl 20min以进一步去除蛋白。 (3)50℃2×SSC,含5mmol/l EDTA溶液中30min。 (4)蛋白酶K(1μg/ml溶于0.1mol/l PBS中,)37℃20~25min。 (5)0.2mol/l 甘氨酸液:室温10min,中止蛋白酶反应。 (6)4%多聚甲醛(PBS新鲜配制):室温20
过多或过少抗体对ChIP结果都有负面影响。 5、 蛋白酶K解交联和DNA纯化。 另外,小编也为大家列举一些疑难杂症及拯救方法: 疑难杂症1:消化的染色质浓度过低 拯救方法: ①如果染色质制备物的 DNA 浓度接近于 50 μg/ml,则向每次 IP 中添加额外的染色质以确保每次 IP 至少产生 5 μg,然后继续实验。 ②在交联之前计算备用平板上细胞的数量,以确定准确的细胞数量,在声波处理前后在显微镜下观察胞核,以证实胞核完全裂解。 疑难杂症2:染色质消化不足且片段过大(大于 900 bp
2 + ) 、4 ×dNTP、DL2 000 Marker、SDS、CTAB、蛋白酶K、RNA 酶、100 条10 聚寡核苷酸随机引物、Tris 饱和酚和EDTA 等:均购自北京鼎国生物技术发展公司;Taq NA 聚合酶:为科隆公司的promege 分装产品;其他常规试剂:均为国产分析纯。 1. 3 随机引物 100 条10 聚寡核苷酸随机引物,购于北京鼎国生物技术发展公司。 1. 4 方法 1. 4. 1 猪链球菌全基因组DNA的提取
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