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- 2025年07月14日
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Peroxidase(POD)
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solarbio
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10mg
说明：POD是一种具有氧化还原酶性质的血红素蛋白。用于生化研究，是酶标记法所用的一种主要酶。也用于生物液体中 葡萄糖和半乳糖的测定
HRP是一种分子量达44 000的糖蛋白，由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成，中性糖和氨基糖约占18％，主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个氯化血红素IX作辅基，该辅基在403nm波长处有最大吸收峰，而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有最大吸收。HRP在403nm的OD值与275nm的OD值之比，也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl)值。RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量，并非表示HRP制剂的真正纯度，而且RZ值高的HRP制剂，并不意味着酶活性也高。但可以一纯酶溶液在10mm光径403nm波长下的吸光度来计算酶浓度[1％(W/V)酶溶液吸光度为22.5，浓度为227umol/L]。纯HRP干燥贮存于–20oC可保持稳定，使用1.36 mol/L甘油、10mmol/L磷酸钠、30umol/L牛血清白蛋白和20umol/L细胞色素C(pH 7.4)溶液作为基质冷冻保存，可使酶结合物稳定数年。HRP对热及有机溶剂的作用比较稳定，用甲苯与石蜡切片处理或用纯乙醇或l0％甲醛水溶液固定做冷冻切片，均不能使其活性改变。或硫化物在10–5～10–6mol/L浓度时具有可逆性地抑制HRP的作用；氟化物、叠氮化合物或羟胺仅在高于10-3mol／L浓度时抑制HRP；HRP还可被羟甲基过氧化氢不可逆地抑制。强酸也是HRP的强烈的抑制剂。
因此，在酶免疫测定常选用上述的某些化合物如叠dan钠和强酸等作为酶反应的终止剂。此外，在配制酶免疫测定的稀释缓冲液时，为防止酶失活，应避免使用叠dan钠作防腐剂。HRP的同工酶主要可分为三种类型：①含糖量高的酸性同工酶。②等电点接近于中性(或微碱)的含糖量相对较低的同工酶。③含糖量低的碱性(PI>11)同工酶。酶免疫试验中所使用的HRP，以PI为8.7～9.0的所谓“C”同工酶为主要组成成分，其他同工酶的活性则很低。“C”同工酶的共价结构由2个密切接近的区域组成，血红素基团则位于其间而成夹心结构，糖链以8个不同的部位结合于多肽。天然的酶所带的纯电荷极少；无游离的。—氨基，仅有2个可测出的组氨酸，6个赖氨酸似乎全被糖链外壳所遮盖。因此，HRP一般仅有1～2个可用于耦联的氨基。
参考文献：
《Neuronostatin promotes soluble Aβ1-42 oligomers –induced spatial learning and memory impairments in mice》 作者:ShaobinYanga1TingjiShaob1PengYuaRuidongCaoaMingyuZhangaKangWenaMaorongFanaBoshengHe 期刊:Behavioural Brain Research 影响因子:3.173 PMID:30753874
《The Combination of piR-823 and Eukaryotic Initiation Factor 3 B (EIF3B) Activates Hepatic Stellate Cells via Upregulating TGF-β1 in Liver Fibrogenesis》 作者:Xuechan Tang,Xiaoli Xie,Xin Wang, Yan Wang,Xiaoyu Jiang, and Huiqing Jiang 期刊:International Medical Journal of Experimental 影响因子:1.42 PMID:30556540
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文献和实验辣根过氧化物酶 horseradish peroxidase
缩写为FRP．为过氧化物酶之一种，含于辣根（ horseradish）中。 1941年 F· Thcorell曾提取其结晶。将之吸入细胞或注入之后，以 3， 3′ -二氨基联苯（ 3， 3′－ diaminobenzidine）为底物进行作用时，在光学或电子显微镜下可以看到一定的标记。最早为 W． Straus（ 1959）曾用以鉴别吞噬小体 Ph-agosome． K． Kristensson和 G． Olsson，（ 1974）在对利用轴突内逆行运输的神经元、轴突分支的着染，并而用于
2 O A 一般在植物界中广泛存在，但在动物组织中存在的知道的不多。动物组织的过氧化物酶反应是由血红蛋白附属的过氧化物酶作用而来的。对辣根（ Armoracialapathifolia）中的这种酶了解得较多， H． Theorell（ 1941）已将其结晶而提纯出来。分子量约 4万 4千，一分子含一个作用基氯高铁血红素。此酶的吸收光谱在 640、 500、 402毫微米处为最大吸收。加入 H2 O2 （或 CH3 OOH）时可见到吸收光谱的变化。这是由于过氧化氢和酶的氯
一、原理AsA-POD催化AsA与H2O2反应，使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸（MDAsA）。随着AsA被氧化，溶液中290nm波长下的消光值（A290）下降，根据单位时间内A290减少值，计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8（mmol/L）/cm计算，酶活性可用每克鲜重每小时氧化AsA的微摩尔数μMol/g·H表示。二、仪器离心机；紫外分光光度计；研钵；试管。三、试剂50mmol/L K2PO4－KH2PO4缓冲液（PH7.0，内含0.1mmol/L EDTA-Na2）
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