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TEV蛋白酶

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  • ¥1000
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • P2060-1000U
  • 2025年07月15日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -80℃,需加干冰运输

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      rTEV Protease

    • 库存

      999

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • 规格

      1000u

    有效期 2年
    别名 rTEV
    英文名称 rTEV Protease
    储存条件 -80℃,需加干冰运输。
    酶活/效价 5U/ul
    外观(性状) 无色透明液体
    单位
    rTEV 蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶,该酶特异性识Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly 七氨基酸序列。rTEV 蛋白酶与肠激酶 U(EK)、Thrombin、FactorXa、SUMO 等蛋白酶相比,具有高活性、高特异性的双重特点,rTEV 蛋白酶因具高剪切活性和特异性,已成为融合蛋白表达后去除融合 tag 的蛋白酶。该酶经 6×His 标签纯化而得(含组胺酸标签),纯度达99%, 剪切反应完毕后可通过His标签纯化树脂Ni-NTA Resin(Cat.No. P2010)去除,以达到纯化目的蛋白的目的。



    1. 不同温度下rTEV酶切活性
     
    反应时间 不同温度下剪切活性(%)
    4°C 16°C 21°C 30°C
    1 h 34 58 56 70
    2 h 58 80 78 90
    3 h 71 99 99 99
    3.5h 84 99 99 99


    影响天然TEV酶活性的常见因素:1)PMSF和AEBSF(1 mM),TLCK(1 mM),Bestatin(1 mg/ml)、Pestatin A(1 mM),EDTA(1 mM)以及E-64(3 mg/ml),以上这些蛋白酶抑制剂对rTEV的活性没有影响;2)Zn离子(>5 mM)对rTEV活性有抑制;3)与半胱氨酸反应的试剂也是rTEV的潜在抑制剂。


    表达方式: A DNA sequence encoding the TEV Protease (NP_062908) (Gly 2038- Gly 2280) was fused with polyhistidine tag at the N-terminus, with a Ser 2256 Asn mutation 
    种属:Human
    表达宿主: E.Coli
    QC Testing
    纯度:> 95%, as determined by SDS-PAGE 
    内毒素:< ﹤1.0 EU per 1μg cytokine as determined by the LAL method.
    稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt -70°C 
    预测N端: Met 1 
    分子量:The recombinant human TEV protease consists of 251 amino acids and has a predicted molecular mass of 28.6 kDa. As estimated in SDS-PAGE under reducing conditions. 
    缓冲液: Supplied as a 0.2μm filtered solution of 50mM Tris, 10%Sucrose,5mM DTT pH8.0 
    SDS-PAGE: 
    Usage Guide
    储存方法:Store it under sterile conditions at -70℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage and usage. Avoid repeated freeze-thaw cycles. 

    使用方法说明:
    1. 推荐使用溶液:50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, 10%甘油,pH 8.0 buffer中进行剪切。
    2. 250×rTEV Protease Buffer:250mM EDTA, 250 mM DTT, PH 8.0
    3. rTEV 蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例:1:100
    4. 酶切体系:

    融合蛋白 1000 μg
    250×rTEV Protease Buffer 4μL
    rTEV 蛋白酶 2μL
    定容至 1000μL
    定容缓冲液:50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl
    5. 酶切条件:在 16℃酶切 6hr。用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索酶切条件,可适当加大酶量或延长酶切时间。
    6. 可取少量样本进行 SDS-PAGE 分析,若要去除酶切后体系中的 rTEV 蛋白酶,可用 His 标签纯化树脂亲和层析。

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    图标文献和实验
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