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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃,需加干冰运输
- 保质期:
2年
- 英文名:
rTEV Protease
- 库存:
999
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 规格:
1000u
| 有效期 | 2年 |
|---|---|
| 别名 | rTEV |
| 英文名称 | rTEV Protease |
| 储存条件 | -80℃,需加干冰运输。 |
| 酶活/效价 | 5U/ul |
| 外观(性状) | 无色透明液体 |
| 单位 | 支 |
表1. 不同温度下rTEV酶切活性
| 反应时间 | 不同温度下剪切活性(%) | |||
| 4°C | 16°C | 21°C | 30°C | |
| 1 h | 34 | 58 | 56 | 70 |
| 2 h | 58 | 80 | 78 | 90 |
| 3 h | 71 | 99 | 99 | 99 |
| 3.5h | 84 | 99 | 99 | 99 |
影响天然TEV酶活性的常见因素:1)PMSF和AEBSF(1 mM),TLCK(1 mM),Bestatin(1 mg/ml)、Pestatin A(1 mM),EDTA(1 mM)以及E-64(3 mg/ml),以上这些蛋白酶抑制剂对rTEV的活性没有影响;2)Zn离子(>5 mM)对rTEV活性有抑制;3)与半胱氨酸反应的试剂也是rTEV的潜在抑制剂。
表达方式: A DNA sequence encoding the TEV Protease (NP_062908) (Gly 2038- Gly 2280) was fused with polyhistidine tag at the N-terminus, with a Ser 2256 Asn mutation
种属:Human
表达宿主: E.Coli
QC Testing
纯度:> 95%, as determined by SDS-PAGE
内毒素:< ﹤1.0 EU per 1μg cytokine as determined by the LAL method.
稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt -70°C
预测N端: Met 1
分子量:The recombinant human TEV protease consists of 251 amino acids and has a predicted molecular mass of 28.6 kDa. As estimated in SDS-PAGE under reducing conditions.
缓冲液: Supplied as a 0.2μm filtered solution of 50mM Tris, 10%Sucrose,5mM DTT pH8.0
SDS-PAGE:
Usage Guide
储存方法:Store it under sterile conditions at -70℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage and usage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
使用方法说明:
1. 推荐使用溶液:50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, 10%甘油,pH 8.0 buffer中进行剪切。
2. 250×rTEV Protease Buffer:250mM EDTA, 250 mM DTT, PH 8.0
3. rTEV 蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例:1:100
4. 酶切体系:
融合蛋白 1000 μg
250×rTEV Protease Buffer 4μL
rTEV 蛋白酶 2μL
定容至 1000μL
定容缓冲液:50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl
5. 酶切条件:在 16℃酶切 6hr。用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索酶切条件,可适当加大酶量或延长酶切时间。
6. 可取少量样本进行 SDS-PAGE 分析,若要去除酶切后体系中的 rTEV 蛋白酶,可用 His 标签纯化树脂亲和层析。
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文献和实验Application of TEV Protease in Protein Production
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RNA-Protein Crosslink Mapping Using TEV Protease
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