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顺丰常温运输
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1ml/T25
收到细胞后处理方法：
1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；
2. 待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:8；
3．传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。
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文献和实验1、吸尽旧的培养液（因为我是养在培养皿)2、用D-HANKs清洗一次3、加入0.125%/0.02%EDTA的胰酶(盖满皿底即可)。肉眼观察即可，看见皿底有一层薄雾。4、加入完全培养基，以终止胰酶作用。5、轻轻反复吹打细胞。6、吸出一部分加入新的培养皿中。注意：1、可以用MEM或DMEM2、EDTA可使细胞分散3、BHK-21生长迅速
吸出培养基，吸得越干净越好，直接加入1ml胰酶（T－25瓶），放到37度培养箱消化。是否需要用hanks 或 pbs之类得缓冲洗细胞并不绝对必要，我都没有洗，感觉应该洗一下更好，但也更麻烦并增加了污染得可能性。如果细胞长得太老，可以先加入1ml胰酶在细胞表面浸润一下就吸出来，然后再加入1ml胰酶消化。胰酶在使用前最好预热到37度。由于胰酶平时保存在4度，反复预热对胰酶的活性不好，我的经验是将胰酶进行分装，尽可能避免胰酶反复冷却加热。消化时间的选择要根据实际情况决定，BHK－21还是比较好消化
的650L生物反应器和无血清培养基进行悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗与转瓶培养工艺进行比较和分析。 1.1主要材料 细胞株：BHK21贴壁细胞株（中国兽医药品监察所） 毒 株：FMDV-O型（某兽用疫苗企业） 培养基：低血清MEM培养基(产品代号MD611)、BHK21细胞无血清培养基（北京清大天一科技有限公司） 血 清：特级新生牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司） 仪 器：5 L反应器（德国贝朗），120L和650LCLAVORUS®生物反应器（北京
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