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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Fructose-1,6-bisphosphatase (FBP)/fructose-1,6-diphosphatase activity assay kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC0920-50T/48S
- 规格:
50管/48样
(FBP)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号: BC0920
规格: 50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体18 μL×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 液体245 μL×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂四 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
- 试剂一:临用前加入45 mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂于2-8℃保存。
- 试剂二:液体置于试剂瓶内EP管中。临用前加入2.5 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂分装后-20℃保存,避免反复冻融。
- 试剂三:液体置于试剂瓶内EP管中。临用前加入2.5 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂分装后-20℃保存,避免反复冻融。
果糖-1,6-二磷酸酶(Fructose 1,6-bisphosphatase,FBP)又称果糖-1,6-二磷酸酯酶,其在糖异生过程和光合作用同化物蔗糖的合成中起关键性的作用。催化1,6-二磷酸果糖和水生成6-磷酸果糖和无机磷。
FBP催化1,6-二磷酸果糖和水,生成6-磷酸果糖和无机磷,在反应体系中添加的磷酸葡萄糖异构酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,测定340nm下NADPH的增加速率,即可计算FBP活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、天平、低温离心机、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰盒、蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
- 当ΔA大于0.6时,建议将样本稀释后再进行测量。
- 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,变化不超过0.02。
- 取0.1g肝脏加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.756-0.647=0.109,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.074-0.062=0.012,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.109-0.012=0.097,按样本质量计算酶活得:
- 取0.1g黑麦草加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定管= A2测定-A1测定=0.785-0.609=0.176,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.074-0.062=0.012,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.176-0.012=0.164,按样本质量计算酶活得:
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BC0730/BC0735*酸羧化酶(PC)活性检测试剂盒
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文献和实验| AuthorYan Ziqi, Du Juan, Zhao Rui, Liu Xu, Xu Junji, Guo Lijia, Liu Yi | Publish_toSTEM CELLS |
果糖才是肥胖的真凶?Nature 最新文章揭示高果糖饮食如何
,丙酮酸与磷酸烯醇丙酮酸(PEP)的比例显著降低,与丙酮酸激酶的抑制效果一致。此外,PKM2 在缺氧组织中的表达很高,例如肿瘤和肠绒毛等。图片来源:Nature果糖主要由糖转运蛋白 GLUT5 转运到肠细胞中,然后被 KHK 磷酸化形成 1-磷酸果糖(F1P)。由于 F1P 在结构上类似于 PKM2 的内源性调节因子 1,6-二磷酸果糖(FBP),因此作者假设 F1P 可能直接抑制 PKM2 的活性。研究发现,F1P 会与 FBP 竞争结合 PKM2 的同一位点,而且一旦结合就能够直接抑制 PKM
:酶亚基上的催化部位 X:酶亚基上的调节部位 FDP:果糖-1,6-二磷酸 变构效应剂可以是酶的底物,也可以是酶系的终产物,还有的是与它们结构不同的其他化合物,一般说,都是小分子物质。一种酶可有多种变构效应剂存在。 果糖-1,6-二磷酸酶的变构过程是T型与R型的可逆转变。有些酶的变构效应还可表现为酶分子的聚合或解聚,如乙酰CoA羧化酶,它是脂肪酸合成过程中的关键酶。它是由四种不同亚基构成的原聚体,每个亚基有不同的功能,分别是:生物素 载体
与调节部位结合后,T型逐步转变成R型,各亚基构象相继发生改变,调节部位相继暴露,与AMP的亲和力逐步增加,酶的活性逐渐减弱,这就是果糖-1,6-二磷酸酶由紧密型变成松弛型的变构过程。抑制变构剂促进高活性型至低活性型的转变,激活变构剂则促进低活性型至高活性型的转变。这一变构过程是可逆的(图9-2)。图中3-磷酸甘油醛和脂肪酸-载体蛋白可使活性型转变为高活性型。 图9-2 果糖-1,6二磷酸酶的变构效应� △:酶亚基上的催化部位 X:酶亚基上的调节部位 FDP:果糖
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