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- XY-SH090
- 国产
- 2026年03月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 英文名：
Fructose 1,6-bisphosphatase，FBP
- CAS号：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
微量法100管/96样
注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
果糖-1,6二磷酸酶又称果糖1,6二磷酸酯酶，催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和无机磷，在糖的异生代谢和光合作用同化物蔗糖的合成中起关键性的作用。
测定原理：
FBP催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和无机磷，在反应体系中添加的磷酸葡萄糖异构酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，340nm下测定NADPH增加速率，即可计算FBP活性。
需自备的仪器和用品：
分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入20mL试剂四充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂二：液体7.2μL×1支，4℃保存；临用前加入1mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1支，-20℃保存；临用前加入1mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体25mL×1瓶， 4℃保存；
样本的前处理：
①总FBP酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP，则按照步骤②提取粗酶液。
测定步骤：
- 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
- 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
- 加样表：
| 试剂名称（μL） | 测定管 |
| 样本 | 20 |
| 试剂二 | 10 |
| 试剂三 | 10 |
| 试剂一 | 160 |
FBP活性计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.02 mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=643×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=643×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：96孔板光径，0.5cm；V样：加入样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
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文献和实验C6 H12 O6 。 D-果糖，亦称左旋糖，是代表性的己酮糖之一，在果汁、蜂蜜中呈游离状态存在，为蔗糖的成分。苹果、番茄中含量特别多，菊科植物含有大量像菊根粉（ inulin）那样的果聚糖。天然游离的果糖是吡喃型，但寡糖、多糖中往往以呋喃型的形态存在。蔗糖受转化酶（蔗糖酶）的作用可游离出果糖。另外甘露醇和山梨醇在相应的脱氢酶作用能氧化成果糖。与甲基吲哚和盐酸一起加温可出现紫红色。为醣类中甜味最强的糖，但α型的甜味仅及β型的三分
最常见的六碳酮糖，存在于果汁、花蜜、蜂蜜及动物精液中。天然的果糖均为 D构型。游离的 D-果糖以吡喃型为主，寡糖和果聚糖中处于结合状态的果糖，则以呋喃型和其他糖联接，如：蔗糖及菊科植物根中的菊粉，均含有结合的呋喃型果糖。在一定的条件下，可自水溶液得到果糖的晶体，果糖晶体熔点为 102～ 104℃，比旋 -132.2°，变旋达平衡时为 -92.2°。 果糖可以被还原为糖醇，也可以被氧化为糖酸。果糖还具有一些醛糖所没有的性质，如：与间苯二酚的呈色反应等。在生物体内，果糖
果糖才是肥胖的真凶？Nature 最新文章揭示高果糖饮食如何
组织的代谢途径，因此一个合理的假设是果糖会促进正常肠上皮的增生，就像它促进肠肿瘤的生长一样。为了验证这一点，来自美国威尔康奈尔医学院的 Marcus D. Goncalves 团队进行了深入研究，2021 年 8 月 18 日，其相关研究结果 Dietary fructose improves intestinal cell survival and nutrient absorption 在线发表在 Nature 杂志上。图片来源：Nature研究内容首先，作者给予小鼠高果糖玉米糖浆（HFCS
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