- ￥1200
- Solarbio
- 北京
- BC4180
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Shikimic acid Dehydrogenase(SD) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC4165-100T/96S
- 规格：
50管/48样
莽草酸脱氢酶（SD）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号: BC4180
规格: 50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2瓶 | -20℃保存 |
- 提取液：内含不溶物，用前摇匀。
- 试剂二：临用前加入10 mL蒸馏水溶解。
- 试剂三：临用前每瓶加入11 mL蒸馏水溶解。
- 工作液的配制：根据用量按照试剂一：试剂二：试剂三为7:4:8的体积比例充分混匀，现用现配，用前25℃预热15min。
莽草酸途径是存在于植物和微生物中的一条重要的代谢途径，莽草酸脱氢酶(EC 1.1.1.25) 是莽草酸合成代谢途径中催化第四步反应的关键酶。
莽草酸脱氢酶催化莽草酸和NADP产生NADPH，检测340nm下的吸光值增加速率来表示SD活性。
Shikimic Acid +NADP NADPH(340nm)
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（加入前摇匀））进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
2、细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3、液体：直接检测。
二、测定步骤具体操作步骤详见“产品资料”附件
- 紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
- 工作液25℃预热10min以上。
- 操作表：在1mL石英比色皿中分别加入下列试剂：
| 试剂名称 | 空白管 | 测定管 |
| 工作液（µL） | 950 | 950 |
| 样本（µL） | - | 50 |
| 蒸馏水（µL） | 50 | - |
| 加入样本即开始计时，充分混匀后于340nm处测定20s时的吸光值A1和5min20s时的吸光值A2，计算ΔA测定管=A2测定-A1测定，ΔA空白管=A2空白-A1空白，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管（空白管只需做1-2次）。 | ||
注意事项：
- 样本提取上清液置于冰上待测，且样本提取完成后建议2h内测完。
- 样本的蛋白浓度需自行测定，由于提取液中含有一定浓度的蛋白（约1mg/mL），所以测定样本蛋白浓度时需扣除提取液自身蛋白浓度。
- ΔA大于1时，建议将样本稀释后再进行测定。当ΔA小于0.01时，可以延长反应时间（10min或15min）来测定。
- 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔，正常情况下，变化不超过0.01。
- 取0.1g萝卜叶，加入1mL提取液，进行样本处理，取上清按照测得步骤操作，测得计算ΔA测定管=A2测定-A1测定=1.441-1.201=0.24，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.24，按照样本质量计算得：SD酶活（U/g 质量）=643×ΔA÷W=1543.2 U/g 质量。
BC2030/BC2035 异柠檬酸裂解酶（ICL）活性检测检测试剂盒
BC3170/BC3175 乙酸激酶（ACK）活性检测试剂盒
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文献和实验BC2030/BC2035 异柠檬酸裂解酶（ICL）活性检测检测试剂盒
BC3170/BC3175 乙酸激酶（ACK）活性检测试剂盒
度。 （2） 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。 （3） 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次，得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次，50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便，干扰物少，是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。
【 实验目的 】 学习紫外分光光度法测定核酸含量的原理和操作方法 【 实验原理 】 核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键系统，能吸收紫外光，RNA和DNA的紫外吸收峰在260nm波长处。一般在260nm波长下，每1ml含1µg RNA溶液的光吸收值为0.022~0.024，每1m1含1µg DNA溶液的光吸收值约为0.020，故测定未知浓度RNA或DNA
