原果胶含量检测试剂盒 微量法

原果胶含量检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC3685
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
提取液一	液体100 mL×1瓶（自备）	2-8℃保存
提取液二	液体50 mL×1瓶	2-8℃保存
提取液三	液体70 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	液体30 mL×1瓶（自备）	2-8℃保存
试剂二	液体3 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂三	液体5 mL×1瓶	2-8℃保存
标准品	粉剂×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 提取液一：80%乙醇，自备。即将80 mL无水乙醇和20 mL蒸馏水混合。
2. 试剂一：浓硫酸30 mL，自备。
3. 标准品：10 mg半乳糖醛酸，临用前加入0.943 mL提取液三，配成50μmol/mL的标准液。

产品说明：
果胶是植物细胞壁主要组成成分之一，分为水溶性果胶和不溶性果胶，不溶性果胶为原果胶。原果胶是不溶于水的物质，但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下，加水分解转变成水溶性果胶，在食品、纺织、印染、烟草、冶金等领域具有较广泛的应用。
原果胶在碱性条件下水解为可溶性果胶，并进一步转化为半乳糖醛酸，产物在强酸中与咔 唑缩合生成紫红色化合物，在530nm处有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、丙 酮、浓硫酸、无水乙醇和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
实验实例：

1. 取0.1g木槿加入1mL 提取液一，室温快速匀浆，95℃水浴20min，冷却至室温，4000g 25℃离心10min，弃上清。沉淀加入1.5mL 提取液一和丙 酮交替各洗2遍（涡旋振荡2min左右，4000g 25℃离心10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入1mL提取液二浸泡15小时，4000g 25℃离心10min，弃上清，加入1mL提取液三，充分匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清液之后按照测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA测定= A测定管-A对照管=0.21-0.12=0.09，依据标准曲线y=0.4121x-0.0183计算X=0.2628μmol/mL，按样本质量计算含量得：原果胶含量(μmol/g 质量)=x÷W=2.628 μmol/g 质量。

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