果胶酶活性检测试剂盒 可见分光光度法

果胶酶活性检测试剂盒说明书

可见分光光度法

注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC2630

规格：50T/24S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
提取液	液体40 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一A	粉剂×1支	2-8℃保存
试剂一B	液体40 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	液体40 mL×1瓶	2-8℃保存
标准品	粉剂×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1、 试剂一：将试剂一A倒入试剂一B于50℃水浴中溶解（期间可拿出振荡数次）。该试剂易长菌，配制完成后可-20℃分装保存，可保存12周。

2、 标准品：10mg半乳糖醛酸。临用前加入0.943mL蒸馏水，配成50μmol/mL的标准液。

产品说明：

果胶酶（pectinase）是分解果胶的酶类，包括原果胶酶，果胶酯酶，多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类，广泛存在于高等植物果实和微生物中，是水果加工中最重要的酶。

果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸与DNS试剂反应生成在540nm有特征吸收峰的棕红色物质，测定540nm处吸光值变化可计算得果胶酶活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：具体的操作步骤请见“产品资料”文件

 

注意事项：

1、 A大于1.5时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定。

2、 植物果实组织建议将样本稀释10倍或20倍后再测定。

实验实例：

1. 0.1g猕猴桃加入1mL提取液进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上稀释10倍后按照测定步骤操作，测得计算ΔA= A测定管-A对照管=1.465-1.45=0.015，依据标准曲线y=0.2575x-0.2214，计

算得x=0.918μmol/mL，按样本质量计算酶活得：

果胶酶活性（U/g质量）=2x÷W×10（稀释倍数）= 183.6 U/g质量。

相关发表文献：

[1] Yuxing Wu,Liangsheng Xu,Zhiyuan Yin,et al. Transcription factor VmSeb1 is required for the growth, development, and virulence in Valsa mali. Microbial Pathogenesis. October 2018;132-138.(IF2.581)

[2] Yuxing Wu,Liangsheng Xu,Zhiyuan Yin,et al. Two members of the velvet family,VmVeA and VmVelB,affect conidiation,virulence and pectinase expression in Valsa mali. Molecular Plant Pathology. November 2017;(IF4.379)

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