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植物硝态氮含量检测试剂盒 可见分光光度法

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  • ¥460
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  • 北京
  • BC1500
  • 2025年07月09日
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    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Plant nitrate nitrogen content detection kit

    • 库存

      999

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC1500-50T/24S

    • 规格

      50管/24样

    植物硝态氮含量检测试剂盒说明书

    可见分光光度法

    货号:BC1500

    规格:50T/24S

    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

    试剂名称

    规格

    保存条件

    试剂一

    粉剂×2

    2-8℃保存

    试剂二

    液体100 mL×1

    2-8℃保存

    标准品

    粉剂×1

    2-8℃保存

    溶液的配制:

    1、 试剂一:临用前根据用量每瓶加入2 mL浓硫酸充分溶解;配制好后尽快使用,2-8℃可保存一周。

    2、 标准品:10 mg硝*钾,临用前加入0.935 mL 蒸馏水溶解,配成1400 μg/mLNO3-N标准液。

    产品说明:

    硝酸盐是植物吸收的主要含氮物质之一。硝酸盐在植物体内的还原部位不同可以在根内也可以在枝叶内进行且因植物类别和环境条件而异。因此测定植物体内硝氮含量变化对了解氮代谢机制有重要的意义。

    在浓酸条件下,NO3-可以与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,后者在PH>12的条件下呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可比色测定计算硝态氮含量。

    技术指标:

    最低检出限:0.7534 μg/mL

    线性范围:0.875-84 μg/mL

    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

    需自备的仪器和用品:

    可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、浓硫酸、冰和蒸馏水。

    操作步骤:

    一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

    按照质量(g):蒸馏水体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,室温匀浆后置于90℃恒温水浴锅中浸提30min,期间不断晃动或者置于90℃恒温摇床中振荡提取30min,待冷却后于25℃12000g离心15min,取上清待测。

    二、测定步骤

    1. 分光光度计预热30min以上,调节波长至410nm,蒸馏水调零。

    2. 1400μg/mL NO3-N标准液用蒸馏水50倍稀释成28μg/mL的标准溶液。

    3. 操作表:

     

     

    试剂名称

    测定管

    对照管

    标准管

    空白管

    样本(μL

    40

    40

     

     

    标准溶液(μL

     

     

    40

     

    蒸馏水(μL

     

    60

     

    40

    试剂一(μL

    60

    -

    60

    60

    充分混匀,25℃静置30min

    试剂二(μL

    1400

    1400

    1400

    1400

    混匀,涡旋振荡,使出现的沉淀充分溶解,取1mL1mL玻璃比色皿中测定410nm处吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A空白管。

    三、植物NO3-N的计算

    1. 按样本质量计算

    NO3- N含量(μg/g 质量)=ΔA÷ΔA标准÷C标准)×V提取÷W=28×ΔA÷ΔA标准÷W

    2. 按样本蛋白浓度计算

    NO3- N含量(μg/mg prot=ΔA÷ΔA标准÷C标准)×V提取÷Cpr×V提取)=28×ΔA÷ΔA标准÷Cpr

    W:样本质量,gC标准:标准溶液浓度,28μg/mLV提取:样本总体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mL

    注意事项:

    1.试剂一和试剂二均具有强腐蚀性,操作时需做好防护措施。

    2.如果样本吸光值大于1.4,建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。

    实验实例:

    1、 0.1g苹果加入1mL蒸馏水进行样本处理,取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA=A测定管-A对照管=0.560-0.002=0.558ΔA标准管=A标准管-A空白管=0.563-0.01=0.553,按样本质量计算含量得:

    NO3-N含量(μg/g质量)=28×ΔA÷ΔA标准÷W=28×0.558÷0.553÷0.1=282.5 μg/g质量。

    2、 0.1g叶片加入1mL蒸馏水进行样本处理,取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA=A测定管-A对照管=0.907-0.645=0.262ΔA标准管=A标准管-A空白管=0.563-0.01=0.553,按样本质量计算含量得:

    NO3-N含量(μg/g质量)=28×ΔA÷ΔA标准÷W=28×0.262÷0.553÷0.1=132.7 μg/g质量。

    相关发表文献:

    [1] Fuyuan Zhu,Moxian Chen,Wailung Chan,et al. SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses. Journal of Proteomics. September 2018;(IF3.537)

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    图标文献和实验
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    Publish_toBiomass Conversion and Biorefinery
    IF4.0000
    PMID
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