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植物花色苷含量检测试剂盒 可见分光光度法

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  • ¥520
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC1380
  • 2025年07月14日
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    • 详细信息
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    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Plant Anthocyanin Content Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC1380-50T/24S

    • 规格

      50管/24样

    植物花色苷
    含量检测试剂盒说明书

    可见分光光度法
    货号:BC1380
    规格:50T/24S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    提取液 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂一 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存
    产品说明:
    花色苷是一类可食用的易溶于水等溶剂的天然色素。花色苷使植物呈现多彩的颜色,本身更具有多种保健作用,因而在天然食用色素、保健品和医药行业都有着广阔的应用前景。


    根据花色苷在不同pH下的结构性质测定花色苷含量,在pH1时花色苷在530nm处有最大吸收峰,而当pH4.5时,花色苷转变为无色查尔酮形式在530nm处无吸收峰,通过测定不同pH下的530nm700nm处的吸光度值计算样本中花色苷的含量。
     注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器用品:
    可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器和蒸馏水。
    操作步骤
    一、样本处理可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献
    按照样本质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约 0.1g样本,加入1mL提取液),充分匀浆后转移到EP管中, 封口膜封口防止挥发,60℃浸提30min,期间可震荡数次,提取后提取液定容至1mL12000rpm,常温离心10min,取上清液待测。
    二、测定步骤
    1. 可见分光光度计预热30min以上,蒸馏水调零。
    2. 加样表:
    试剂名称(μL 测定管1 测定管2
    样本 100 100
    试剂一 900 -
    试剂二 - 900
    充分混匀后测定测定管1和测定管2分别在530nm700nm处的吸光度,测定管1530nm700nm处的吸光值记为A1A1’,测定管2530nm700nm处的吸光值记为A2A2’,计算ΔA=A1-A1’-A2-A2’)。

    三、花色苷含量计算
    1. 按样本质量计算
    花色苷含量(μmol/g 质量)=[ΔA÷(ε×d)×103×F] ×V提取÷W=0.037×ΔA×F÷W
    1. 按样本蛋白浓度计算
    花色苷含量(μmol/mg prot=[ΔA÷(ε×d)×103×F] ×V提取÷(Cpr ×V提取)=0.037×ΔA×F÷Cpr
    F:稀释倍数,该反应体系下为10d:比色皿光径,1cmW:样本质量,gε:花色苷的摩尔消光系数,2.69×104mL/mmol/cm;V提取:提取液总体积,1mL103:单位换算系数,1mmol=103μmolCpr:样本蛋白浓度,mg/mL(蛋白浓度需用PBS单独提取后自行测定)。
    注意事项:
    1. 如果A1大于1,可以适当加大稀释倍数,保证总体积1mL不变,如50μL上清液和950μL试剂一(相当于稀释20倍);如果A1小于0.1,可以适当缩小稀释倍数,保证总体积不变,如500μL上清液和500μL试剂一(相当于稀释 2 倍),使A1保持在0.1~1范围内,可提高检测灵敏度;注意应同样调整上清液和试剂二体积比例;计算时以实际稀释倍数代入计算公式中。
    2. 因提取液会使蛋白变性,若使用蛋白浓度计算需用PBS单独提取后自行测定。
    实验实例:
    1. 取0.1g西梅皮加入1mL提取液充分匀浆后转移到EP管中,封口膜封口防止挥发,60℃浸提30min,期间可震荡数次,提取后提取液定容至1mL,离心取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA=A1-A1’-A2-A2’=0.249-0.101-0.133-0.065=0.08,按样本质量计算含量得花色苷含量(μmol/g质量)=0.037×ΔA× F÷W =0.037×0.08×10÷0.1=0.296 μmol/g 质量。
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    图标文献和实验
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    IF8.1000PMID
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