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土壤脂肪酶(S-LPS)活性检测试剂盒 可见分光光度法

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  • ¥540
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC3980
  • 2025年07月14日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Soil Lipase(S-LPS) Activity Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC3980-50T/24S

    • 规格

      50管/24样


    土壤脂肪酶(S-LPS)活性检测试剂盒说明书
    可见分光光度法
    货号: BC3980
    规格: 50T/24S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    试剂一 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二 液体6 mL×1瓶 常温保存
    试剂三 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂四 液体20 mL×1瓶 2-8℃保存
    标准品 液体59.3 μL×1支 2-8℃保存
    溶液的配制:
    1. 标准品:临用前加入1.97 mL甲苯,即100 μmol/mL油酸。用前注意解冻溶解。用不完的试剂可以2-8℃保存一个月。
    2. 工作液的配制:将试剂三临用前加入20 mL蒸馏水于沸水浴中溶解,2-8℃保存两周。冷却至常温后加入5 mL试剂二混合,高速震荡2次,每次3min,间隔5min。可根据该比例现用现配。
    产品说明:
    脂肪酶(LPS)又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。该酶在土壤生物动力学中具有重要的作用。
    LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。
    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
    可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、震荡混匀器、恒温水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、研钵、甲苯(不可快递)、冰和蒸馏水、30-50目筛。
    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
    一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
    新鲜土样自然风干,过30-50目筛。
    二、测定步骤
    1. 分光光度计预热30min以上,调节波长至710nm,甲苯调零。
    2. 标准溶液的稀释:取50µL 100µmol/mL油酸标准溶液,加入950µL甲苯,充分混匀,配制成5µmol/mL标准溶液待测,现用现配。(实验中每管需要1mL。)
     
    1. 操作表:取2mL EP管,加入下列试剂
    加入试剂(μL) 对照管 测定管 标准管 空白管
    土样(g) 0.1 0.1 - -
    甲苯 50 50 - -
    使土样充分润湿,常温放置10min。 - -
    试剂一 500 500 - -
    工作液 - 500 - -
    置于37℃恒温培养箱或37℃恒温水浴锅中准确反应1h,期间可震荡数次使土样和样本充分接触。之后沸水浴10min(缠封口膜,防止EP管崩开导致水分散失),自然冷却至室温。 - -
    工作液 500 - - -
    甲苯 1200 1200 - -
    反复震荡混匀后,室温4000rpm离心10 min - -
    取出离心管,小心吸取上层有机相1mL,加入另一1.5mL EP管中,按下表操作:
    上层溶液 1000 1000 - -
    5µmol/mL标准溶液 - - 1000 -
    甲苯 - - - 1000
    试剂四 250 250 250 250
    反复充分震荡混匀;室温4000rpm离心10min,小心吸取上层有机相溶液800μL,加入1mL玻璃比色皿,于710nm处测定吸光值。记为A对照管、A测定管、A标准管、A空白管,计算ΔA测定=A测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A空白管。空白管和标准管只需做1-2次。

    注意事项:
    1、甲苯有毒,实验过程中需佩戴手套和口罩。
    2、实验过程中须远离火源。
    3、当吸光度大于0.8时,建议将样本稀释后测量(第二次加入甲苯的量增加)。
    4、甲苯可溶解聚苯乙烯/聚丙烯材质。

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