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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Soil Lipase(S-LPS) Activity Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC3980-50T/24S
- 规格:
50管/24样
土壤脂肪酶(S-LPS)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号: BC3980
规格: 50T/24S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体6 mL×1瓶 | 常温保存 |
| 试剂三 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 液体59.3 μL×1支 | 2-8℃保存 |
- 标准品:临用前加入1.97 mL甲苯,即100 μmol/mL油酸。用前注意解冻溶解。用不完的试剂可以2-8℃保存一个月。
- 工作液的配制:将试剂三临用前加入20 mL蒸馏水于沸水浴中溶解,2-8℃保存两周。冷却至常温后加入5 mL试剂二混合,高速震荡2次,每次3min,间隔5min。可根据该比例现用现配。
脂肪酶(LPS)又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。该酶在土壤生物动力学中具有重要的作用。
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、震荡混匀器、恒温水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、研钵、甲苯(不可快递)、冰和蒸馏水、30-50目筛。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干,过30-50目筛。
二、测定步骤
- 分光光度计预热30min以上,调节波长至710nm,甲苯调零。
- 标准溶液的稀释:取50µL 100µmol/mL油酸标准溶液,加入950µL甲苯,充分混匀,配制成5µmol/mL标准溶液待测,现用现配。(实验中每管需要1mL。)
- 操作表:取2mL EP管,加入下列试剂
| 加入试剂(μL) | 对照管 | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
| 土样(g) | 0.1 | 0.1 | - | - |
| 甲苯 | 50 | 50 | - | - |
| 使土样充分润湿,常温放置10min。 | - | - | ||
| 试剂一 | 500 | 500 | - | - |
| 工作液 | - | 500 | - | - |
| 置于37℃恒温培养箱或37℃恒温水浴锅中准确反应1h,期间可震荡数次使土样和样本充分接触。之后沸水浴10min(缠封口膜,防止EP管崩开导致水分散失),自然冷却至室温。 | - | - | ||
| 工作液 | 500 | - | - | - |
| 甲苯 | 1200 | 1200 | - | - |
| 反复震荡混匀后,室温4000rpm离心10 min | - | - | ||
| 上层溶液 | 1000 | 1000 | - | - |
| 5µmol/mL标准溶液 | - | - | 1000 | - |
| 甲苯 | - | - | - | 1000 |
| 试剂四 | 250 | 250 | 250 | 250 |
注意事项:
1、甲苯有毒,实验过程中需佩戴手套和口罩。
2、实验过程中须远离火源。
3、当吸光度大于0.8时,建议将样本稀释后测量(第二次加入甲苯的量增加)。
4、甲苯可溶解聚苯乙烯/聚丙烯材质。
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文献和实验The effect of novel aquaculture mode on phosphorus sorption-release in pond sediment点击查看
| AuthorJuchen Xu, Jie Wang, Shen Lin, Liang Hou, Shuaibing Ma, Yabing Lv, Ruiya Chen, Xugang He, Jie Hou | Publish_toSCIENCE OF THE TOTAL ENVIRONMENT |
| IF9.8000 | PMID |
脂肪酶(Lipase, LPS)是一组特异性较低的脂肪水解酶类,主要来源于胰腺,其次为胃及小肠,能水解多种含长链脂肪酸的甘油酯。通常胰腺以等量分泌脂肪酶及共脂肪酶进入循环,但因共脂肪酶相对分子量较小,可以从肾小球滤出,急性胰腺炎时,共脂肪酶/脂肪酶比例下降。测定方法有滴定法、电极法、比浊法、分光光度计法及荧光光度计法。 1.正常参考值: 偶联法健康成人脂肪酶活性:1~54 U/L
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(7)式或(9)式可计算叶绿素总量。 叶绿体色素的提取液中除含有叶绿素a与b外,还含有叶黄素和胡萝卜素,因为叶黄素和胡萝卜素的吸收光谱均在蓝光区,故不会干扰叶绿素含量在红光区的分光光度法测定。 器材与试剂 722分光光度计,叶绿体色素提取所需器材。 方法与步骤 1. 提取叶绿素。 2. 测定光密度。 在1cm比色杯中,注入叶绿素提取液(浓度大时需稀释)。另以叶绿素提取介质作为参比溶液注入同样的比色杯中。根据实验要求,选用相应的波长(测总量选用652nm,测叶绿素a、b含量
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