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土壤脂肪酶(Solid-Lipase,S-LPS)活性试剂盒

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  • ¥730
  • xuanya
  • XY-SH239
  • 国产
  • 2026年02月19日
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      69

    • 英文名

      Solid-Lipase,S-LPS

    • CAS号

      /

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      100管/96样

    土壤脂肪酶(Solid-LipaseS-LPS)活性试剂盒说明书
                                                      微量法100/96S

        正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
    测定意义:
    LPS又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS广泛的存在于各种生物中。

    测定原理:
    LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。

    自备仪器和用品:
    研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪、甲苯80mL冰和蒸馏水。

    试剂组成和配制:
    试剂一:液体65mL×24保存。
    试剂二:液体10mL×1瓶,4保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡20min
    试剂三:甲苯80mL×1瓶,4保存(自备)。
    试剂四:液体10mL×1瓶,4保存。
    标准品:液体10 μL×1瓶,10 µmol/mL的标准溶液,4保存。临用前加入3.168 mL甲苯,充分溶解。

    样本处理
    建议称取约0.1g土样,加入1mL试剂一进行冰浴匀浆,再用回旋式振荡器振荡提取15min4℃,4000g离心10min,取上清待测。

    S-LPS测定操作:
    1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到710 nm,蒸馏水调零。
    2. 试剂一和试剂二置于37水浴预热30min
    3. 1.5mL EP管中依次加入下列试剂
    试剂名称(μL 空白管 测定管
    蒸馏水 150  
    样本   50
    试剂一 300 300
    试剂二   100
    37振荡反应10 min
    试剂三 800 800
    37振荡反应10 min后,8000g25,离心10min,取上清液
    试剂名称(μL 空白管 测定管 标准管
    上清液 400 400  
    标准品     400
    试剂四 100 100 100
    37振荡反应5 min后,静置5min,取200μL上层液加入微量石英比色皿/96孔板,于710nm处测定吸光值。
    注意:空白管和标准管只需测定一次。

    S-LPS活性计算公式:
    活性单位定义:37中每克土样每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。
    S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C标准品×(A测定管-A空白管A标准管- A空白管)]×V反总÷W×V÷V样总)÷T
    =16×[(A测定管-A空白管A标准管- A空白管)]÷W
    C标准品:10 µmol/mLV反总:反应总体积,0.8mLV样:反应中加入样本体积,0.05mLV样总:加入提取液体积,1mL W:样本质量,gT:催化反应时间,10 min

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