- ￥3250
- Solarbio
- 北京
- BC3175
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Acetokinase(ACK) Activity Assay Kit
- 库存：
现货
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC3175-100T/96S
- 规格：
100管/96样
乙酸激酶（ACK）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC3175
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
| 试剂四 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂五 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
| 试剂六 | 液体48 μL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂七 | 液体55 μL×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂八 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂九 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
- 提取液：临用前将试剂九加入到提取液中，并于2-8℃保存；
- 试剂二：临用前每瓶加入1 mL蒸馏水，充分溶解待用。用不完的试剂仍2-8℃保存；
- 试剂三：临用前每瓶加入1 mL蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂-20℃保存；
- 试剂四：临用前每瓶加入2 mL蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂-20℃保存；
- 试剂五：临用前每支加入0.5 mL蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂-20℃保存；
- 试剂六：液体置于试剂瓶内EP管中。临用前根据样本量将试剂六、蒸馏水按43:457（V:V）的比例配制备用，现用现配；
- 试剂七：液体置于试剂瓶内EP管中。临用前根据样本量将试剂七、蒸馏水按1:9（V:V）的比例配制备用，现用现配；
- 试剂八：临用前加入5 mL蒸馏水，充分溶解待用。用不完的试剂仍2-8℃保存；
- 工作液：吸取0.06 mL 试剂二、0.2 mL试剂三、0.13 mL试剂四、0.04 mL试剂五、0.04 mL试剂六、0.04 mL试剂七、0.2 mL试剂八混匀，也可根据比例现用现配，于冰上备用。
ACK广泛存在于生物体内，催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP，是细菌碳代谢和能量代谢的关键酶，尤其是在古细菌甲烷合成代谢中起着中枢作用。
测定原理如下：（1）ACK催化乙酸钠和ATP生成乙酰磷酸和ADP，（2）丙 酮酸激酶催化ADP和PEP生成ATP和丙 酮酸，（3）乳酸脱氢酶催化丙 酮酸和NADH生成乳酸和NAD+，（4）在340nm下测定NADH氧化生成NAD+
速率，即可反映ACK活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
- 测定过程中样本和所有试剂在冰上放置，以免变性和失活。
- 反应液的温度必须保持37℃或25℃，比色皿测定时可取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
- ΔA大于1时，建议稀释后测量，注意计算公式乘以稀释倍数；ΔA小于0.01时，建议延长反应时间测量，注意计算公式变化。
- 取0.1g肾脏组织样本，加入1mL提取液进行匀浆研磨，取上清后按照测定步骤操作，用微量石英比色皿测得计算ΔA测定=A测定1-A测定2=1.7666-1.0488=0.7178，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.3902-1.3553=0.0349，ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.7178-0.0349=0.6829，按样本质量计算酶活得：ACK（U/g 质量）=536×ΔA÷W=536×0.6829÷0.1=3660.344 U/g 质量。
- 取500万大肠杆菌加入1mL提取液超声破碎，离心，取上清后按照测定步骤操作，用微量石英比色皿测得计算ΔA测定=A测定1-A测定2=1.3965-1.3503=0.0462，ΔA空白=A空白1-A空白2=1.3902-1.3553=0.0349，ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.0462-0.0349=0.0113，按细菌数量计算酶活得：ACK（U/104 cell）=1.072×ΔA=1.072×0.0113=0.0121136 U/104 cell。
- Mukhopadhyay S, Hasson M S, Sanders D A. A continuous assay of acetate kinase activity: Measurement of inorganic phosphate release generated by hydroxylaminolysis of acetyl phosphate[J]. Bioorganic chemistry, 2008, 36(2): 65-69.
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验| AuthorPuli Zhu, Yilin Wang, Hui Bai, Jing Feng, Rui Zhang, Duo Bu, Zeng Dan, Wei Li, Xuebin Lu | Publish_toFermentation-Basel |
| IF3.7000 | PMID |
【求助】核转录因子活性检测试剂盒TransAM p65: 是不是一定要做标准曲线啊
tasthma 请问有没有那位战友用过activ motif 公司的核转录因子活性检测试剂盒TransAM p65啊？我想请教一下，是不是一定要做标准曲线啊？ zhujoker 这种试剂盒一般都是需要做标准曲线的。 tasthma 谢谢版主！那我还得买他们的标准蛋白才行啊 zhuqueleee 没有必要的。 我当时用的就是这个试剂盒，因为到最后数值
joo 如题，要做衰老，没有决定定哪家的SA-bata-gal的检测试剂，请教大家都用什么呀？另外看到碧云天很便宜，谁用过他家这个产品吗？ joo 求助！ joo 自己顶！ zmz_1 I am using this in Boston, works very well. check the data sheet. applied
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