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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Rubisco-Bisphosphate Carboxylase/Oxygenase (Rubisco) Activity Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC0445-100T/96S
- 规格:
100管/96样
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0445
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
| 试剂四 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
- 试剂三:临用前加入0.5 mL蒸馏水充分溶解待用,振荡溶解后若出现浑浊可以离心使用;
- 试剂四:临用前加入1 mL 蒸馏水充分溶解待用;
- 工作液的配制:临用前在试剂二中加入全部试剂一,充分混匀,在25℃孵育5min。
1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(Rubisco, EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一个关键酶,既控制着CO2的固定,同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流,其活性的大小直接影响着光合速率。
在Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与1分子的CO2结合,产生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA);PGA可通过外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-磷酸,伴随着NADH氧化生成NAD+;在340 nm NADH有特征吸收峰,而NAD+没有此吸收峰,因此测定340nm吸光度下降速率可以代表Rubisco的羧化酶活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
实验实例:
- 取0.1g植物叶片,加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管= A1测定-A2测定=1.2647-1.1825=0.0822,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.8649-0.8502=0.0147,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0822-0.0147=0.0675,按样本质量计算酶活得:
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文献和实验| AuthorYun Huang, Jingwei Fu, Ao Xia, Xianqing Zhu, Xun Zhu, Qiang Liao | Publish_toCHEMICAL ENGINEERING JOURNAL |
| IF16.7440 | PMID |
核酮糖二磷酸加氧酶 ribulose-diphosphateoxygenase
为催化核酮糖二磷酸被分子氧氧化而产生甘油酸 -3-磷酸和乙醇酸磷酸的酶。实际就是核酮糖二磷酸羧化酶( EC4. 1. 1. 39),此酶除具羧化酶活性之外,在有氧时也具有加氧酶的活性。是构成光呼吸或氧对光合作用抑制(瓦布格效应)的原因。
尔化学奖。(一)C3途径的反应过程C3途径是光合碳代谢中最基本的循环,是所有放氧光合生物所共有的同化CO2的途径。1.过程 由RuBP开始至RuBP再生结束,共有14步反应,均在叶绿体的基质中进行。全过程分为羧化、还原、再生3个阶段。(1)羧化阶段(carboxylation phase) 指进入叶绿体的CO2与受体RuBP结合,并水解产生PGA的反应过程。以固定3分子CO2为例:3RuBP+3CO2+3H2O PGA + 6H+核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)具有双重功能,既能使RuBP
经膜上的运转器(translocator)才能通过;蔗糖、C5`C7糖的二磷酸酯、NADP+、PPi等物质则不能通过。2.基质及内含物 被膜以内的基础物质称为基质(stroma),基质以水为主体,内含多种离子、低分子的有机物,以及多种可溶性蛋白质等。基质是进行碳同化的场所,它含有还原CO2与合成淀粉的全部酶系,其中1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(ribulose1,5bisphosphate carboxylase/oxygenase,Rubisco)占基质总蛋白的一半以上。此外,基质中含有氨
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