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Ca++Mg++-ATP酶检测试剂盒 微量法

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  • ¥580
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC0965
  • 2025年07月14日
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    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Ca++Mg++ ——ATPase Activity Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC0965-100T/48S

    • 规格

      100管/48样


    Ca++Mg++-ATP酶活性检测试剂盒说明书
    微量法
    货号:BC0965
    规格:100T/48S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    试剂一 液体60 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二 液体4 mL×1 瓶 2-8℃保存
    试剂三 粉剂×2 -20℃保存
    试剂四 液体2 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂五 液体3 mL×1 2-8℃保存
    试剂六 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂七 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂八 液体5 mL×1 瓶 常温保存
    标准品 液体1 mL×1支 2-8℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂三:临用前取1支加入1 mL蒸馏水充分混匀待用;现用现配。用不完的试剂-20℃分装保存一周。
    2. 试剂六:临用时加入5 mL蒸馏水,溶解后2-8℃保存两周。
    3. 试剂七:临用时加入5 mL蒸馏水,溶解后2-8℃保存两周。
    4. 标准品:10mmol/L 标准磷贮备液。将标准品20倍稀释,即取0.1 mL标准品加1.9 mL蒸馏水充分混匀,配成0.5 μmol/mL标准磷应用液,现用现配。
    5. 定磷剂的配制:按H2O:试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1(体积比)比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂根据样本量现用现配。
    注意:配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
    产品说明:
    Ca++Mg++-ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
    根据Ca++Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。


    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:

       可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
    注意事项:
    1. 由于每一个样都必须做对照,本试剂盒100管只能测48Ca++Mg++-ATP酶。
    2. 此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。避免磷污染是检测成败的关键。
    实验实例:
    1. 取0.1g胰腺加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清置冰上,按照测定步骤操作,使用96孔板测得ΔA测定=0.535-0.238=0.297,ΔA标准=0.280-0.043=0.237,按样本质量计算酶活得:
    Ca++Mg++-ATP酶活力(U/g 质量) =7.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W=93.99 U/g 质量。
    1. 取0.1g柳树加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清置冰上,按照测定步骤操作,使用96孔板测得ΔA测定=0.105-0.099=0.006,ΔA标准=0.280-0.043=0.237,按样本质量计算酶活得:
    Ca++Mg++-ATP酶活力(U/g 质量) =7.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W=1.90 U/g 质量。
    相关发表文献:
    1. Yupu Jing,Hongli An,Shanjing Zhang,et al. Protein kinase C mediates juvenile hormone-dependent phosphorylation of Na+. Journal of Biological Chemistry. November 2018;(IF4.106)
    参考文献:
    1. Datiles M J, Johnson E A, McCarty R E. Inhibition of the ATPase activity of the catalytic portion of ATP synthases by cationic amphiphiles[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Bioenergetics, 2008, 1777(4): 362-368.
    关系列产品:
    BC0060/BC0065 Na+k+-ATP酶活性检试剂盒
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