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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Ca++Mg++ ——ATPase Activity Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC0965-100T/48S
- 规格:
100管/48样
Ca++Mg++-ATP酶活性检测试剂盒说明书
微量法
货号:BC0965
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体4 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2支 | -20℃保存 |
| 试剂四 | 液体2 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂五 | 液体3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂六 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂七 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂八 | 液体5 mL×1 瓶 | 常温保存 |
| 标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
- 试剂三:临用前取1支加入1 mL蒸馏水充分混匀待用;现用现配。用不完的试剂-20℃分装保存一周。
- 试剂六:临用时加入5 mL蒸馏水,溶解后2-8℃保存两周。
- 试剂七:临用时加入5 mL蒸馏水,溶解后2-8℃保存两周。
- 标准品:10mmol/L 标准磷贮备液。将标准品20倍稀释,即取0.1 mL标准品加1.9 mL蒸馏水充分混匀,配成0.5 μmol/mL标准磷应用液,现用现配。
- 定磷剂的配制:按H2O:试剂六:试剂七:试剂八=2:1:1:1(体积比)比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂根据样本量现用现配。
产品说明:
Ca++Mg++-ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
根据Ca++Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
- 由于每一个样都必须做对照,本试剂盒100管只能测48份Ca++Mg++-ATP酶。
- 此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。避免磷污染是检测成败的关键。
- 取0.1g胰腺加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清置冰上,按照测定步骤操作,使用96孔板测得ΔA测定=0.535-0.238=0.297,ΔA标准=0.280-0.043=0.237,按样本质量计算酶活得:
- 取0.1g柳树加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清置冰上,按照测定步骤操作,使用96孔板测得ΔA测定=0.105-0.099=0.006,ΔA标准=0.280-0.043=0.237,按样本质量计算酶活得:
相关发表文献:
- Yupu Jing,Hongli An,Shanjing Zhang,et al. Protein kinase C mediates juvenile hormone-dependent phosphorylation of Na+. Journal of Biological Chemistry. November 2018;(IF4.106)
- Datiles M J, Johnson E A, McCarty R E. Inhibition of the ATPase activity of the catalytic portion of ATP synthases by cationic amphiphiles[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Bioenergetics, 2008, 1777(4): 362-368.
BC0060/BC0065 Na+k+-ATP酶活性检试剂盒
BC0300/BC0305 ATP含量检测试剂
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文献和实验| AuthorLi Yuanyuan, Shen Zhangfei, Zhang Mengyuan, Yang Xiao-Yuan, Cleary Sean P., Xie Jiale, Marathe Ila A., Kostelic Marius, Greenwald Jacelyn, Rish Anthony D., Wysocki Vicki H., Chen Chong, Chen Qiang, Fu Tian-Min, Yu Yamei | Publish_toNATURE STRUCTURAL & MOLECULAR BIOLOGY |
| IF16.8000 | PMID38177683 |
Purification of a Membrane Protein (Ca2+/Mg2+-ATPase) and Its Reconstitution into Lipid Vesicles
Purification of membrane proteins of necessity requires the use of detergents to solubilize the proteins prior to their isolation. Although reconstitution of membrane proteins has been achieved without the use of detergents (e.g
离子(K+)与镁离子(Mg2 )。在催化ATP水解时利用ATP水解所释放的能量可把Na 传送到细胞外,把K 传送到细胞内。每水解一分子ATP传送3个Na ,2个K 。在钠钾ATP酶的作用过程中ATP的末端磷酸与酶蛋白谷氨酸残基γ羧基形成中间物。 钠钾ATP酶分子量为 15万,有两种亚基,α亚基分子量为 112 200,是催化亚基,由细胞浆中游离核蛋白体合成,β亚基蛋白质部分分子量为 34 900,是糖蛋白,由粗糙内质网系合成,它们都是质膜的固有蛋白。 一般认为
向上旋转 120°的小桥伸出,它是肌球蛋白分子的头部,具有 ATP酶活性,与肌动蛋白反应;另一方面,围绕 A丝构成 I细丝,宛如在六边形顶点的位置围绕 A细丝, I细丝是由肌动蛋白组成的。当不存在 Ca2 时,肌动蛋白不能在肌钙蛋白 -原肌球蛋白系统的作用下与小桥反应,但是由于 Ca2 的作用将抑制解除之后,它可以和肌球蛋白的头部起反应。其结果小桥摆动将 I丝向肌原纤维 A带中央方向拉入约 100纳米。此时,一个分子 ATP被分解,小桥随之脱钩,而与下一个肌动蛋白反应。在这个反应中,由于 I丝从 A带










