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硫氧还蛋白还原酶(TrxR)检测试剂盒 可见分光光度法

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  • ¥260
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC1150
  • 2025年07月16日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Oxidized Thioredoxin Reductase (TrxR) Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC1150-50T/48S

    • 规格

      50管/48样


    硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性检测试剂盒说明书
    可见分光光度法
    注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
    货号:BC1150
    规格:50T/48S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    试剂一 液体100 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二 液体6 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂三 粉剂×2 -20℃保存
    试剂四 液体30μL×1支 -20℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂三:试剂放于瓶内玻璃瓶中,临用前取1瓶加入3.33 mL蒸馏水溶解,用不完的试剂-20℃保存2
    2. 试剂四:体积量少,请离心后再使用。临用前根据样本数量将试剂四用无水乙醇稀释10倍后使用。
    产品说明:
        TrxRECEC 1.8.1.9是一种NADPH依赖的包含FAD结构域的二聚体硒酶,属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员,与硫氧还蛋白以及NADPH共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxRGR活性类似,催化*G还原生成GSH,是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。

    TrxR催化NADPH还原DTNB生成TNBNADP+,TNB在412nm有特征吸收峰,但还原型谷胱甘肽与DTNB同样能反应生成TNB,因此本试剂盒利用2-乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型谷胱甘肽,通过测定412nm波长处TNB的增加速率,即可计算TrxR活性。
    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
    可见分光光度计、低温离心机、可调节移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、蒸馏水、冰和无水乙醇。
    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
    注意事项:
    1. 哺乳动物组织及血液制品TrxR活力测定时,一般须用蒸馏水稀释5倍左右;测定过程操作须迅速。
    2. 由于试剂一中含有一定浓度的蛋白(约0.1mg/mL),所以在测定样蛋白浓度时需要减去提取液本身的蛋白含量。
    实验实例:
    1. 取0.1g月季花朵加入1mL 试剂一进行冰浴匀浆,10000rpm4℃离心10min,取上清置冰上,按照测定步骤操作,测得计算ΔA =A2测定-A1测定)-A2空白-A1空白)=0.763-0.716)-(0.082-0.064)=0.029,按样本质量计算酶活得:TrxR(U/g 质量)=147×ΔA测定管-ΔA空白管)÷W=42.63 U/g 质量。
    2. 取0.1g小鼠肝脏组织加入1mL 试剂一进行冰浴匀浆,10000rpm4℃离心10min,取上清稀释2倍置冰上,按照测定步骤操作,测得计算ΔA =A2测定-A1测定)-A2空白-A1空白)=1.508-0.4)-(0.082-0.064)=1.09,按样本质量计算酶活得:TrxR(U/g 质量)=147×ΔA测定管-ΔA空白管)÷W×2(稀释倍数)=3204.6 U/g 质量。
    相关发表文献:
    1. Li B, Li D, Jing W, et al. Biogenic selenium and its hepatoprotective activity[J]. Scientific reports, 2017, 7(1): 1-11.
    2. Zhang L, Fan J, He J, et al. Regulation of ROS–NF‐κB axis by tuna backbone derived peptide ameliorates inflammation in necrotizing enterocolitis[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(8): 14330-14338.
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    该产品被引用文献
    Intracellular Hyperbranched Polymerization for Circumventing Cancer Drug Resistance点击查看
    AuthorChengfei Liu, Banruo Xianyu, Yiheng Dai, Shuojiong Pan, Tianyu Li, Huaping XuPublish_toACS Nano
    IF17.1000PMID37285408
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