- ￥1680
- Solarbio
- 北京
- BC1285
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Diamine Oxidase(DAO) Activity Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC1285-100T/48S
- 规格：
100管/48样
二胺氧化酶（DAO）活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1285
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体2 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 液体140 μL×1支 | 2-8℃保存 |
1. 标准品：临用前取102 μL加入898μL蒸馏水得到1mol/L（即1000μmol/mL）的过氧化氢溶液，2-8℃保存4周。
2. 0.5μmol/mL标准溶液的配制：取20μL 1000μmol/mL 标准液和980μL蒸馏水混合配成20μmol/mL 标准液；再取25μL 20μmol/mL 标准液和975μL蒸馏水混合配成0.5μmol/mL标准溶液备用。
产品说明：
DAO（EC1.4.3.6）广泛存在于动物（肠黏膜、肺、肝脏、肾脏等）、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛，其活性与核酸和蛋白质合成密切相关，能够反映肠道机械屏障的完整性和受损程度。
DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢，H2O2氧化亚铁*中的Fe2+生成Fe3+，Fe3+进一步与4-氨基安替比林和酚反应生成红色醌类化合物，在505nm处有特征吸收峰，通过测定505nm处的吸光值来计算DAO的活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
- 称取0.1009g竹叶样本，加入1mL提取液进行冰浴匀浆，10000g 4℃离心20min，取上清置冰上待测，之后按照测定步骤，用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=1.0176-0.4116=0.6060，ΔA标准=A标准管
-A空白管=0.3557-0.0767=0.279；按样本质量计算酶活得：
DAO活性 (U/g 质量) = 0.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W×F =10.763 U/g 质量
- 称取0.1000g十二指肠样本，加入1mL提取液进行冰浴匀浆，10000g 4℃离心20min，取上清置冰上待测，之后按照测定步骤，用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.2336-0.1803=0.0533，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.3557-0.0767=0.279；按样本质量计算酶活得：
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文献和实验| AuthorXuemei Meng, Lei Ge, Jiawei Zhang, Jinkai Xue, Graciela Gonzalez-Gil, Johannes S. Vrouwenvelder, Zhenyu Li | Publish_toSCIENCE OF THE TOTAL ENVIRONMENT |
| IF9.8000 | PMID37290651 |
. （二）方法学评价 1、手工法：有折射计法、粘度法、比密测定法、离心法和放射性核素法。温氏法：采用中速离心，不能完全排除红细胞间残留血浆，测定结果偏高，已属淘汰。微量法：采用高速离心，细胞间残留血浆比温氏法少（约2%），且样本用量小、操作简便、残留血浆1%～3%. 2、血液分析仪法：仪器法CV为1%，手工法CV为2%，仪器法应注意红细胞增多症或血浆渗透压异常时会出现误差。 （三）质量控制 1、手工法：抗凝剂量不准确、混匀不充分、离心速度不够会产生误差。红细胞形态异常（如小红
行，则只需几分钟；③特异性强；④使用方便、简单。二、载体 具有吸附抗原（或抗体）的载体很多，如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物的红血球、某些细菌等。良好载体有如下几点基本要求：①在生理盐水或缓冲液无自凝倾向；②大小均匀；③比重与介质相似，短时间内不能沉淀；④无化学或血清学活性；⑤吸附抗原（或抗体）后，不影响其活性。目前应用最广的是人的O型红血球和绵羊红血球。而后者应用更广，因为其来源方便。另外绵羊红血球的表面有大量的（约1000个以上）糖蛋白受体，极易吸附某些抗原物质，吸附性能好，且大小均匀
1、手工法：有折射计法、粘度法、比密测定法、离心法和放射性核素法。温氏法：采用中速离心，不能完全排除红细胞间残留血浆，测定结果偏高，已属淘汰。微量法：采用高速离心，细胞间残留血浆比温氏法少（约2%），且样本用量小、操作简便、残留血浆1%～3%。 2、血液分析仪法：仪器法CV为1%，手工法CV为2%，仪器法应注意红细胞增多症或血浆渗透压异常时会出现误差。
