- ￥650
- Solarbio
- 北京
- BC1270
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Protein Carbonyl Content Assay Kit
- 库存：
99
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC1270-50T/24S
- 规格：
50管/24样
试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1270
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 粉剂×3支 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体18 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体18 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂四 | 液体40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂五 | 液体230mL×1瓶（自备） | 2-8℃保存 |
| 试剂六 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
- 试剂一：使用前根据样本数，每支加2mL水震荡溶解后离心取上清使用，每支为10个样本用量，溶液变黑后即不可再继续使用；
- 试剂五：自备乙酸乙酯和无水乙醇，根据测定样本量，将乙酸乙酯和无水乙醇等体积混合。（提供1个125mL空瓶）
蛋白质羰基化是指氨基酸残基侧链中的氨基或亚氨基受到氧自由基攻击最后转变成醛基，并释放NH3+的过程.其在体内的形成主要是通过金属离子催化氧化系统完成。蛋白质羰基是多种氨基酸在蛋白质的氧化修饰过程中的早期标志，其含量高低表明蛋白质氧化损伤程度的大小，是衡量蛋白质氧化损伤的主要指标。
羰基与2,4-*二*腙，在370nm处有特征吸收峰。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
天平、恒温水浴锅/培养箱、低温离心机、超声细胞破碎仪、漩涡震荡仪、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水、无水乙醇和乙酸乙酯。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
1. 试剂一使用之前根据要测定的样本数现配，配置好后4℃保存，若变为黑色，则不能使用。
实验实例：
取0.2g小鼠心脏加入2mL提取液充分匀浆后于4℃，5000rpm离心10min，取上清，加入0.2mL试剂一，室温放置10min，4℃，12000rpm离心10min，取上清，按照测定步骤操作，测得A370测定管=1.269，A370对照管=1.048，按样本质量计算酶活得：
蛋白质羰基含量（μmol/g质量）=（A370测定管-A370对照管）÷8÷W=0.1381 μmol/g质量。
取0.2g国槐叶片加入2mL提取液充分匀浆后于4℃，5000rpm离心10min，取上清，加入0.2mL试剂一，室温放置10min，4℃，12000rpm离心10min，取上清，按照测定步骤操作，测得A370测定管=0.137，A370对照管=0.012，按样本质量计算酶活得：
蛋白质羰基含量（μmol/g质量）=（A370测定管-A370对照管）÷8÷W=0.0781 μmol/g质量。
取胎牛血清样本按照说明步骤操作，直接测定，测得A370测定管=0.578，A370对照管=0.278，按液体体积计算酶活得：
蛋白质羰基含量（μmol/mL）=（A370测定管-A370对照管）÷17.6=0.0170 μmol/mL。
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验| AuthorMeijuan Lan, Tongshuai Li, Lin Li, Shaoyun Wang, Juncheng Chen, Tangyu Yang, Zhiru Li, Yipeng Yang, Xia Zhang, Bing Li | Publish_toFOOD CHEMISTRY |
| IF8.8000 | PMID37776650 |
蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次，得到吸光度的相对标准偏差。表1 精密度测定结果 2.3 稳定性 取1mg/ml牛 血清 蛋白标准溶液每十分钟测定一次，50分钟内的吸光度变化如下表2。表2 稳定度测定结果 3. 结论该方法测定快速、简便，干扰物少，是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定的紫外分光光度法。
度。 （2） 吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。 （3） 计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。
同时测定OD260nm，与OD280nm。，然后根据两种波长的吸收度的比值，通过经验公式校正，以消除核酸的影响而推算出蛋白质的真实含量。本法操作简便迅速，且不消耗样品(可以回收)，多用于纯化之蛋白质的微量测定。主要缺点：当待测的蛋白质与标准蛋白质中的酪氨酸和色氨酸含量差异较大时，则产生—定误差，混有核酸时必须分别测定280nm和260nm两处的OD值，再按公式推算蛋白质含量。[操作]取试管7支,各管混匀，盛于石英杯中，用紫外分光光度计，以空白管调节零点，分别于280nm、260nm波长下测定各管光密
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