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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Glutamine Synthetase(GS)Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC0910-50T/24S
- 规格:
50管/24样
谷氨酰胺合成酶(GS)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0910
规格:50T/24S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体12 mL×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂二 | 液体12 mL×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2瓶 | -20℃保存 |
| 试剂四 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三:临用前取一瓶加入5mL蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂-20℃分装可保存4周,避免反复冻融。
产品说明:
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
GS 在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ-谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合物在540nm处有最大吸收峰。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
实验实例:
- 称取0.125g鼠肾,加入1mL提取液进行冰浴匀浆,按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算∆A=A测定-A对照=0.323-0.047=0.276,带入公式计算:
- 称取0.110g 鼠肝,加入1mL提取液进行冰浴匀浆,按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算∆A=A测定-A对照=1.203-0.036=1.167,带入公式计算:
- 称取0.158g 黄豆芽,加入1mL提取液进行冰浴匀浆,按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算∆A=A测定-A
GS(U/g 质量)= 19×ΔA÷W =13.223 U/g 质量。
相关发表文献:
- Zhao B, Tian M, An Q, et al. Characteristics of a heterotrophic nitrogen removal bacterium and its potential application on treatment of ammonium-rich wastewater[J]. Bioresource technology, 2017, 226: 46-54.
- Su Yilu,Zhou Zhi,Yu Xiaopeng.Possible roles of glutamine synthetase in responding to environmental changes in a scleractinian coral[J].Molecular biology reports,2018,45(6).
- Fei Ding,Qiannan Hu,Meiling Wang,Shuoxin Zhang.Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants[J].International Journal of Molecular Sciences,1999,19(12):4046.
- Jie Wang,Wei Zhou,Hui Chen,Jiao Zhan,Chenliu He,Qiang Wang.Ammonium Nitrogen Tolerant Chlorella Strain Screening and Its Damaging Effects on Photosynthesis[J].other,-1,9(-1):3250.
- Shan Li,Yonghang Tian,Kun Wu,Yafeng Ye,Jianping Yu,Jianqing Zhang,Qian Liu,Mengyun Hu,Hui Li,Yiping Tong,Nicholas P. Harberd,Xiangdong Fu.Modulating plant growth-metabolism coordination for sustainable agriculture[J].other,-1,560(7720):595–600.
- Haghighat N. Estrogen (17β-Estradiol) enhances glutamine synthetase activity in C6-glioma cells[J]. Neurochemical research, 2005, 30(5): 661-667.
- Bressler S L, Ahmed S I. Detection of glutamine synthetase activity in marine phytoplankton: optimization of the biosynthetic assay[J]. Mar. Ecol. Prog. Ser, 1984, 14: 207-217.
BC0080/BC0085 硝酸还原酶(NR)活性检测试剂盒
BC1450/BC1455 谷氨酰胺酶(GLS)活性检测试剂盒
BC1460/BC1465 谷氨酸脱氢酶(GDH)活性检测试剂盒
BC0070/BC0075 谷氨酸合成酶(GOGAT)活性检测试剂盒
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文献和实验| AuthorTao Chen, Min-Xing Zhao, Xiao-Yue Tang, Wen-Xiao Wei, Xin Wen, Shi-Zheng Zhou, Bao-Hua Ma, Yong-De Zou, Na Zhang, Jian-Dui Mi, Yan Wang, Xin-Di Liao, Yin-Bao Wu | Publish_toJOURNAL OF HAZARDOUS MATERIALS |
| IF13.6000 | PMID37348375 |
一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色
一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
, 5~10min/次?→ECL显影或NBT/BCIP显色。结果:2、荧光分光光度计分析原理:活化的Caspase-3能够特异切割D1E2V3D4-X底物,水解D4-X肽键。根据这一特点,设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD-AMC.在共价偶联时,AMC不能被激发荧光,短肽被水解后释放出AMC,自由的AMC才能被激发发射荧光。根据释放的AMC荧光强度的大小,可以测定caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度。 方法:收获细胞正常或凋亡细胞,PBS洗涤,制备细胞裂解液,加Ac










