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- Solarbio
- 北京
- P1041
- 2025年08月03日
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北京索莱宝
- 规格：
10ml
5×蛋白上样缓冲液（含巯基还原剂）
规格： 10ml
保存： 2-8℃保存，自发货之日起至少 3 个月有效。
产品简介：
本产品适用于 SDS-PAGE(SDS 变性聚丙xi酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，巯基还原剂，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。
SDS 可与蛋白质结合使蛋白质－SDS 复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS 还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构，β-巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质的四级结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
使用说明：
1. 请按每 40μL 蛋白样品加入 10μL 上样缓冲液的比例（5 倍稀释）来使用。如果蛋白浓度过高，可用双蒸水稀释。
2. 混匀后，100℃水浴加热 3-5 分钟，使蛋白变性。
3. 冷却到室温后，10000-14000rpm 离心 2-5 分钟，取上清直接上样电泳即可。
注意事项：
1. 聚丙xi酰胺凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在 30kd 左右，胶浓度 12%时，约在20kd 左右，胶浓度 15%时，大概在 10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2. 本试剂因含巯基还原剂，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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参考文献：
《HDAC2, but not HDAC1, regulates Kv1.2 expression to mediate neuropathic pain in CCI rats》 作者:Zhihua Li, Yanyan Guo, Xiuhua Ren, Lina Rong, Minjie Huang, Jing Cao, Weidong Zang 期刊:Neuroscience 影响因子:3.244 PMID:31022463
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu, Yubing Liang, Yong Xiao, Jing Lv, Ruicong Guan, Fei Xiao, Yubo Xie, and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影响因子:3.208 PMID:30858699
《Lysophosphatidic acid induces the migration and invasion of SGC-7901 gastric cancer cells through the LPA2 and Notch signaling pathways》 作者:Zhiheng Ren, Chenli Zhang, Linna Ma ,Xiao Zhang ,Shuxia Shi ,Deng Tang, Jinyu Xu ,Yan Hu ,Binsheng Wang ,Fangfang Zhang , Xu Zhang, Haixue Zheng 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.928 PMID:31115486
《The ionophore antibiotic gramicidin A inhibits pancreatic cancer stem cells associated with CD47 down-regulation》 作者:Rui-Qi Wang, Jing Geng, Wei-Jin Sheng, Xiu-Jun Liu, Min Jiang and Yong-Su Zhen 期刊:Cancer Cell International 影响因子:3.439 PMID:31139022
《miR-429 suppresses cell proliferation, migration and invasion in nasopharyngeal carcinoma by downregulation of TLN1》 作者:Zhihui Wang, Zhiquan Zhu, Zhong Lin, Youli Luo, Zibin Liang, Caibin Zhang, Jianxu Chen and Peijian Peng 期刊:Cancer Cell International 影响因子:3.439 PMID:31068760
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文献和实验-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次（对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤）。 加入预冷的 RIPA 液（含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂），RIPA 液的用量：按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注：悬浮细胞，收集
入 DMSO 或 2-巯基乙醇，混合后加入 L 连接反应液 (含重组质粒)，温和混匀，置冰上 30 min；2. 42 ℃ 水浴 45 秒，然后迅速放回冰中 1～2 min；3. 加入 2 mL LB 培养液，37 ℃ 轻摇荡培养 1 h；4. 4,000×g 离心 10 秒钟，弃上清，用 LB 培养液重悬菌体；5. 将菌液铺于含有适当抗生素的 LB 琼脂培养板上，涂匀，室温放置 20～30 min，倒置于 37 ℃ 孵箱中培养 12～16 h。（三）转化细胞的筛选【实验原理】1、 蓝白筛选:以 TA
它的蛋白溶液可以冻存)与Zwittergent 等双性离子去垢剂； ③还原剂：DTT、DTE、TBP、Tris-base 等；④蛋白酶抑制剂及核酸酶：EDTA、PMSF、蛋白酶抑制剂混合物(Protease inhibitor cocktails)等，如为了去除缓冲液中存在的痕量重金属离子，可在其中加入0.1～5mmol/LEDTA，同时使金属蛋白酶失活。 三、 仪器和试剂 仪器 离心机、移液器、研钵、离心管、冰箱。 试剂 1. 20mL 样品提取缓冲液：2.5mL
