片段化酶（LC）

核酸电泳应用——制备型和分析型电泳

的片段进行凝胶定量。（B）凝胶定量的标准曲线。 c. 分析样品纯度、完整度、片段化和合成效率 可以使用凝胶电泳来评估从其来源提取的核酸样品的纯度和完整性，以及样品片段化的成功以及合成后全长寡核苷酸的百分比。 污染 RNA 样品的基因组 DNA，反之亦然，可以使用凝胶电泳检测样品纯度（图 4A）。污染种类检测时需取决于所用核酸染色剂的灵敏度以及污染物含量。 使用凝胶电泳，提取后总 RNA 的完整性可以通过评估 28S 和 18S rRNA 的相对强度来检查，其中 2：1 比率指示完整的 RNA。条带

干货 | CUT and Tag 核心酶 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase 大解密

，接头与插入片段之间有 9 bp 的 gap 需要补平（如图 6 ），这就是为什么 Tn5 建库在 PCR 之前必须进行 72℃ 反应 3min ，而且所用的 PCR 酶需是具有链置换功能的非热启动酶。 图 6. Tn5 文库缺口补平 传统建库方式需要经过 DNA 片段化、末端修复、接头连接、文库扩增等步骤，耗时较长，而使用 Tn5 转座酶进行文库构建，可将 DNA 片段化、末端修复、接头连接等多步反应转变为一步简单的酶促反应，极大缩短建库时间，提高工作效率。 图 7. 转座酶文库结构

Cell Rep Med：中山大学项鹏 / 邓春华团队联合开发基因疗法恢复小鼠睾酮分泌与生育能力

睾丸间质细胞（Leydig cell，LC）合成分泌了男性体内超过 95% 的睾酮，对维持男性性征、内分泌稳态及生殖功能至关重要。当基因突变损害 LC 的正常功能引起睾丸间质细胞衰竭（Leydig cell failure，LCF），则会导致睾酮缺乏、性发育异常和男性不育。外源性睾酮补充虽能部分恢复患者的血清睾酮水平，但会引起多种严重的不良反应，且进一步抑制精子生成。因此，亟需寻找替代疗法。 LCF 的根本原因是参与睾酮合成的基因存在缺陷，基因治疗是最具潜力的策略之一。腺相关病毒