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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
237
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
1ml|5ml
特别提示:包括磷酸酶抑制剂混合物在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:磷酸酶抑制剂混合物
产品货号:HR0294
产品规格:1ml|5ml
组织细胞裂解过程中释放大量内源性蛋白lín酸酶,以各种方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化。本蛋白lín酸酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白lín酸酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白lín酸酶活性。该混合物优化的组成使其可以强烈几乎所有重要的蛋白lín酸酶活性,包括蛋白丝/苏氨酸磷酸酶、蛋白酪氨酸磷酸酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等。该混合物为100倍浓缩水溶液,可用于直接加入任何组织类型和细胞的裂解产物中,均能有效抑制磷酸化蛋白质的去磷酸化,从而维护蛋白质的磷酸化状态。适用于Western Blot和免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等。
储存条件:2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
●本试剂仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用方法:
按照1:100 比例,将混合物加入组织细胞裂解液中,混匀即可。
我公司销售的磷酸酶抑制剂混合物质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 注意:在准备做磷酸(酯)酶实验的时候,不加磷酸酯酶抑制剂。 一、工作液配制 配制 100 ml 的 modified RIPA buffe: 1.称取 790 mg 的 Tris-Base,加到 75 ml 去离子水中,加入 900 mg 的 NaCl,搅拌
【求助】(Western Blot) 检测不到P-erk却能检测到erk
biozk 一抗都是cst的,二抗对照也没有问题,细胞裂解液里有磷酸化酶抑制剂,请问可能是哪里的问题?谢谢。 msniu 你说的是正常现象啊。erk细胞内本来就有很多,可以检测到,而p-erk是激活后才有的,有的细胞p-erk是激活的,有的细胞p-erk不是激活的,需要刺激激活。不激活的检测不到。你要是怕实验操作有问题,可以做个用EGF激活的做阳性对照。还有一种情况是,你细胞的erk磷酸化水平低,曝光时间短了,信号没显
细胞膜,释放胞浆蛋白;离心分离细胞核沉淀后,再通过高盐及较强裂解条件释放核蛋白。 关键试剂成分与作用: ·低浓度非离子去垢剂(0.1%~0.5% NP-40 / Triton X-100):温和破坏细胞膜,对细胞核影响较小,是胞浆裂解常用成分; ·缓冲盐、蔗糖等成分:维持适宜渗透环境,Tris-HCl / HEPES 等用于维持稳定 pH; ·高盐缓冲液:可减弱部分核蛋白与核酸、染色质的相互作用,提高可溶性核蛋白提取效率; ·蛋白酶 / 磷酸酶抑制剂:全程添加,防止蛋白降解与去磷酸化,尤其适用
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