kFluor647-EdU法细胞增殖检测试剂盒(成像)

特别提示：包括kFluor647-EdU法细胞增殖检测试剂盒(成像)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：kFluor647-EdU法细胞增殖检测试剂盒(成像)
产品货号：KFS329
产品规格：1000T

细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。最精确的检测细胞增殖方法是BrdU法。EdU法检测试剂盒是brdu方法的革命性突破。EdU（5-溴-2-脱氧尿嘧啶）试剂盒是一种嘧啶类似物，可以在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测是基于“点击”反应，一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃的原子共价反应。

本试剂盒中，EdU试剂含有炔烃，而kFluor647染料试剂含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效，易于使用。只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。标准化的戊二*固定和去污剂促渗可以使检测试剂进入细胞，而brdu方法则需要DNA变性（如酸变性、热变性或者用Dnase消化）去暴露BrdU，从而方便BrdU抗体结合。

本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组份，可以检测细胞增殖与细胞周期分析。对于细胞周期的分析，试剂盒可以提供蓝色细胞核染料Hoechst33342。

除了kFluor647-EdU法细胞增殖检测试剂盒(成像),，我公司还供应以下相关产品：



名称：DNA银染试剂盒
货号：SNM515
规格：20T

名称：细胞活力检测试剂盒(96孔荧光计)
货号：KFS331
规格：500T|1000T
我司细胞活力检测试剂盒提供了一种可靠、灵敏、安全和低成本的快速有效检测细胞活力与毒性的方法。本产品利用灵敏的易被氧化还原的物质通过在细胞生长的培养基中所产生的化学还原反应，将非荧光信号的染料转换成为红色荧光物质，从而检测细胞的存活率。该荧光信号可以用530nm 的激发波激发，在590nm 处可以获发射波。检测所产生的荧光信号是与样品中的活细胞数成正比的。根据不同类型的细胞，本试剂盒最低可以检测到至少40 个细胞/孔，同时保证很好的重现性和灵敏度。

操作说明
以下操作可用作通用指导建议。考虑不同细胞类型与培养条件的差异性，有必要根据实际情况优化您的操作步骤。
1.96 孔细胞培养板每孔100μL 培养基饲养细胞，控制细胞数目在40~10000 个/贴壁细胞，2000~500000 个/悬浮细胞。设置空培养基做对照。
2.加入10μL 检测液至培养基中，37 度避光孵育5-6 小时。
3.荧光微孔板读数530nm 激发，590nm 发射波读数。

名称：阿尔玛蓝
货号：SY0503
规格：100T
阿尔玛蓝（Alamar Blue）是一种氧化还原指示剂，能根据代谢活性产生吸亮度变化和荧光信号。这是一种安全无毒的染料，可用于细胞活性和细胞增殖的定量分析以及细胞因子生物测定和体外细胞毒性研究，能有效测定动物、真菌和细菌细胞的天然代谢活性。Alamar Blue在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性，而在还原状态下，转变为呈粉红或红色荧光的还原产物，反映所研究的细胞或微生物对氧分子的消耗，因而常被用作氧化还原指示剂，以显示被观察细胞和细菌的代谢活动。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。在细胞增殖过程中，细胞内NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，处于还原环境。摄入细胞内的染料被这些代谢中间体及细胞色素类还原后释放到细胞外并溶于培养基中，使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性，因此对应的信号较低。可以用普通分光光度计或荧光光度计检测，其激发光波长在530-560 nm之间，发射光波长为590 nm。吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比。

本品可广泛地用于细胞增殖代谢，药物的细胞毒作用的体外测定以及病原微生物的的快速检测与鉴定。 与台盼兰、TTC、MTT、MTS等分析法相比，Alamar Blue具有更多的优势。Alamar Blue采用单一试剂，可以连续、快速地检测细胞的增生状态。由于Alamar Blue对细胞无毒、无害，不影响细胞的抗体合成与分泌等活性，因此可以对同一批细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察，因此有操作简便和几乎不干扰细胞正常代谢的特点。

注意事项
1）需客户自行准备100%还原型Alamar Blue试剂。为得到还原型Alamar Blue，需配制Alamar Blue与细胞培养基的混合溶液，Alamar Blue与细胞培养基的比值为1:10，高压灭菌15min。（不能对浓缩的Alamar Blue高压灭菌，也不能用PBS配制溶液，因为100%还原型Alamar Blue在PBS中不稳定。）
2）为得到最好的结果，建议实验前先摸索孵育时间和接种细胞数量。
3）合适密度的细胞可以增加检测灵敏度。对于96 孔板，我们建议每孔接种100 微升细胞，细胞浓度范围为：贴壁细胞在100-10,000/孔，悬浮细胞在2,000-50,000/孔，并以培养基为空白对照。对于384 孔板，细胞浓度和接种量均减半。
4）整个过程均应为无菌操作，因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。
5）注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长，会导致继发性还原反应，产生无色和荧光消失。
6）孵育时，须避光。
7）本产品可以使用荧光或分光光度计检测，但荧光的灵敏度高，实验误差小，推荐使用荧光检测。

储存条件：4℃，有效期一年