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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
381
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
- 规格:
100ml|500ml
特别提示:包括伊红染色液(醇溶,0.5%)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:伊红染色液(醇溶,0.5%)
产品货号:GL2628
产品规格:100ml|500ml
用途:
又称曙红染色液,常规切片染色
注意事项:
乙醇溶解,含防腐剂
储存条件:室温,12个月
除了伊红染色液(醇溶,0.5%),,我公司还供应以下相关产品:
名称:甲基绿染色液
货号:YT166
规格:100ml
本染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成绿色的染色液。甲基绿可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本甲基绿染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫组化染色后再进行甲基绿复染。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。
注意事项:
1. 需自备4%多聚jiǎ醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲*,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇以及二甲*。
2. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
储存条件:室温,有效期一年。
名称:苏木素染液
货号:KFS116
规格:100ml
苏木素是一种天然染料,是组胚,病理,泌尿,妇产科及各实验室中zuì常用的染色剂,主要用于细胞核染色。带正电荷的碱性染料苏木素与细胞核中带负电荷的酸性物质结合使细胞核染成蓝色。
操作步骤
1. 将样本涂于清洁的玻片上,制成薄涂片
2. 将涂片放于95%乙醇固定5-6 分钟,然后置空气中晾干。
3. 滴加苏木素染液6-8 滴盖满样本,染色5-8 分钟,流水洗去多余染液。即可镜下观察。此片一般可保存半年以上。若想多年长期保存可进行4 和5 步操作。
4. 依次置入两个无水乙醇缸中脱水,每缸1 分钟。
5. 再移入二甲*缸中,透明1 分钟,中性树脂封片,镜检。
染色结果:镜检结果:胞核呈蓝紫色。
注意:染色太浅可重复步骤3,复染。染色太深可用0.1%盐酸-酒精脱色。
储存:室温,有效期一年。
名称:革兰氏染色试剂盒
货号:HR8327
规格:200ml
通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙*脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。
储存条件:室温密封保存。
有效期:一年。
产品特点:
快速革兰染色液可缩短染色时间,通常经过初染-媒染-脱色-复染四步,整个染色过程只需5分钟,不容易造成假阳性和假阴性,能够准确鉴别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,具有操作简便、方法可靠,试剂性质稳定、保质期长,结果易于观察等特点。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 玻片●染缸 ● 滴管 ● 光学显微镜
使用方法:
1.涂片:
液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm 左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,zuì后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而均匀。
2.晾干:让涂片在空气中自然干燥。
3.固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。
4.染色:将固定过的涂片放报纸上,滴加初染液,染1min。
5.水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
6.媒染:滴加1 滴媒染液,染1min,水洗。
7.脱色:吸去残留水,滴加脱色液脱色20-30s,将玻片不停摇动,至流出液无紫色,立即水洗。
8.复染:滴加复染液复染3-5min,水洗。
9.结果观察。
结果分析:
革兰氏阳性菌都呈紫色,革兰氏阴性菌都呈红色
注意事项:
1.标本涂片不能太厚。较厚的涂片应延长脱色时间。
2.固定时通过火焰的温度不能太高。
3.脱色剂脱色是革兰氏染色的重要步骤,如脱色过度则阳性菌误染成阴性菌,如脱色不够,则阴性菌误染成阳性菌,脱色时间要掌握好。
4.在实验中如果出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全。假阴性可能是因为细胞固定过度,造成细胞壁通透性的改变,而出现假阴性结果;另外,细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶,也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果。
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培养 24 - 48 h,细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清,该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基: 待细胞汇合度~50%时,移去原有完全培养基,添加新培养基进行培养,新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成; 待细胞生长汇合度约为70-80%时,移去培养基; 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次; 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h,待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液,该上清液即可用于外泌
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