GpC 甲基转移酶（M.CviPI）

特别提示：包括GpC 甲基转移酶（M.CviPI）在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：GpC 甲基转移酶（M.CviPI）
英文名称：GpC methyl transferase (M.CviPI)
产品货号：SV1159
产品规格：1KU|200U

特性:
阻止限制性内切酶的切割
改变 DNA 的物理特性:
对 DNA 统一进行 [3H] 标记
概述:
GpC 甲基转移酶（M.CviPI）能将双链二核苷酸识别序列 5´ ...GC...3´ 中所有胞嘧啶残基（C5）甲基化。
来源:
分离自重组的 E. coli 菌株，该菌株表达小球藻病毒（Chlorella virus）的甲基转移酶，该酶与麦芽糖结合蛋白（MBP）组成融合蛋白。
反应条件:
1X GC 反应缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl，10 mM DTT（pH 8.5 @ 25℃）]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸（SAM，随酶提供），37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意:
MgCl2 并不是必需的辅因子。
质保声明:
GpC 甲基转移酶经过严格的质控检测，确保该产品具有zuì高的活性和纯度。更多信息请联系我们咨询。
单位定义:
1 酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HaeIII 限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。
浓度:
4,000 units/ml，通过 λDNA 检测。
注意事项:
胞嘧啶残基被甲基化后，可影响 DNA 的物理特性:，如:降低 Z-DNA 形成的自由能，增加 DNA 的螺旋程度，改变 DNA 十字形突出的动力学特性:。由于在化学测序过程中联氨的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。

除了GpC 甲基转移酶（M.CviPI）,，我公司还供应以下相关产品：



名称：BsmBI限制性内切酶
货号：SV0193
规格：1KU|200U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 50*%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 25%
特性
重组酶、省时酶。
反应条件
BalbBuffer 3.1，55℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度
10,000units/ml。
37℃ 时活性
20%。
甲基化敏感性
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项
BsmBl是Esp3l的完全同裂酶。
*在该缓冲液中可能出现星号活性。

名称：ClaI限制性内切酶
货号：SV0289
规格：5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对dam和哺乳动物CpG甲基化敏感。
注意事项:
Clal是BspDl的完全同裂酶。

名称：DNA 聚合酶 I，（Klenow）大片段
货号：SV0961
规格：1KU|1KU|200U|100U
特性:
用随机引物制备探针
切除 3´ 突出端或补平 5´ 突出端，形成平末端
cDNA 第二条链的合成
概述:
DNA 聚合酶 I，大片段（Klenow 片段）是 E. coli DNA 聚合酶 I 的蛋白水解产物，具有 DNA 聚合酶活性和 3´→5´ 核酸外切酶活性，但缺失了 5´→3´ 核酸外切酶活性。Klenow 既保留了全酶的高保真性，又不会降解 DNA 5´ 末端。
来源:
重组 E. coli 菌株，携带有 E. coli polA 基因，该基因去除了 5´→3´ 核酸外切酶结构域。
浓度:
5,000 和 50,000 units/ml。
热失活:
75℃ 20 分钟。
使用注意事项:
由于该酶具有 3´→5´ 核酸外切酶活性，升高反应温度、加入过量的酶、未加入 dNTP 或反应时间过长均会导致 DNA 末端碱基被切除形成凹陷。

名称：ProtoScript II 反转录酶
货号：SV1359
规格：10KU|4KU|40KU
特性:
不同起始量的 RNA 均能高效反转录
提高热稳定性
合成至少 10 kb 长度的 cDNA
概述:
ProtoScript II 反转录酶是 M-MuLV 反转录酶的重组蛋白，其RNase H 活性降低且热稳定性增加。与野生型M-MuLV 反转录酶相比，ProtoScript II 可在更高的温度下合成第一链cDNA。ProtoScript II 活性温度高达50℃，且具有特异性高、产量高和合成 cDNA 更长的特点，合成 cDNA 长度可达 12 kb。本产品曾用名为 M-MuLV 反转录酶 (RNaseH-)。
来源:
来自重组 E. coli 菌株，携带有突变的 MMuLV 反转录酶（RNase H-）编码基因，经高度纯化而获得。
反应条件:
1X ProtoScript II 反转录酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃)，75 mM KCl，3 mM MgCl2]，10 mM DTT，200 units ProtoScript II ，0.5 mM dNTPs（不随酶提供）和 5 μM dT23VN（不随酶提供），42℃ 温育 50 分钟。如果使用随机引物建议在室温放置 10 分钟后再进行 42℃ 反应。
热失活:65℃ 20 分钟。
质保声明:
通过 RT-PCR 验证，以总 RNA 为模板可合成 9.2 kb 的 cDNA。
单位定义:
1 单位指在 50 μl 反应体系中，以 poly(rA) 为模板，以 oligo(dT)18 为引物，37℃ 条件下，10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
200,000 units/ml。

名称：DNA聚合酶I
货号：WH0162
规格：500U|5000U
DNA Polymerase I在模板和引物（DNA或RNA）存在的条件下，以dNTP作底物，沿5"-3"方向催化与模板互补DNA的合成。同时本酶还具有5"-3"外切核酸酶活性以及3"-5"外切核酸酶的活性。另外，本酶可催化切刻平移反应。本产品来源于含有PolA基因的大肠杆菌重组菌株。分子量大小约为103.1kDa。本制品浓度为10U/μl。

产品特点：
·可催化切刻平移反应；
·酶比活性高，稳定性好，与其他酶兼容能力强。

产品组成：

组分	WH0162-1	WH0162-2
DNA Polymerase Ⅰ	500U	5000U
10×Buffer	500μl	1.5ml

储存条件：-25℃～-15℃保存。

贮存液成分：25mM Tris-HCl，0.1mM EDTA，1mM DTT，50%甘油

适用范围：
1．在二代测序（NGS）应用中，主要用于mRNA测序文库构建过程中cDNA第二链的合成。
2．与DNase I或者RNase H一起使用，进行切刻平移反应。

单位定义：1单位活力定义为在37℃、30min内，将10nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需的酶量。

质量控制：

性质	描述
蛋白纯度	＞99%
酶活性	6,850U/mg
单链外切酶活性	200U酶中，有活性
双链外切酶活性	200U酶中，有活性
双链内切酶活性	200U酶中，未检出
宿主基因组污染	200U酶中，＜10个拷贝

使用方法：
在NGS文库构建过程中，一般按终浓度0.3U/μl的量加入DNA聚合酶I。也可根据实验具体情况来调整用量。
反应条件：16℃，120min。
反应结束以后，后续一般会进行产物纯化操作。