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一年
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钦诚生物
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50T
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文献和实验原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下,①具有再生细胞壁,进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力;②具有摄取外源大分子、细胞器,以及细菌,病毒的能力,因此是进行遗传操作,基因转移的好材料;③通过同种和异种植物的原生质体融合,可产生异核体,实现体细胞杂交,培育出新品种。 实验原理 去掉植物细胞壁的方法可以是机械的人工操作,也可以利用酶解法。较早利用机械法制备原生质体的首推Klercker(1892),直到1960 年英国科学家Cocking 才第一次用酶法大量制备
。(8) 溶壁酶酶液:1.5%,用0.6MMgSO4配制,过滤除菌;(9) 培养皿:根据样品个数2. 制备方法:(1) 称取离心管重量并记录;(2) 用接种针挑出菌丝,并用灭菌双蒸水冲洗一次,然后用无菌的0.6M MgSO4冲洗两次,用灭菌的滤纸吸干,放入已知重量的离心管,称重并记录;(3) 计算得到菌丝重量,按0.2(g):1(mL)加入灭菌酶液,震荡均匀;(4) 28℃,3~4小时,摇床震荡(轻微),酶解,同时每30min镜检观察原生质体数量;(5) 灭菌注射器(含脱脂棉和玻璃钎维)过滤
一、ELISA试剂盒的组成 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分: (1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂); (2)酶标记的抗原或抗体(结合物); (3)酶的底物; (4) 阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中); (5)结合物及标本的稀释液; (6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水; (7)酶反应终止
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