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- 钦诚生物
- QC06-004
- 2026年09月18日
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1KIT
名称：人胎盘羊膜间充质干细胞成骨诱导分化培养试剂盒
产品编号：QC06-004
二、 产品简介
人胎盘羊膜间充质干细胞成骨诱导分化培养试剂盒。包括间充质干细胞成骨分化基础培养基、人胎盘羊膜间充质干细胞成骨诱导分化试剂盒和茜素红染色液。 本产品仅用于科研，不可用于临床治疗、诊断及其他用途。
三、主要组成成分包括：
间充质干细胞成骨分化基础培养基 110mL 4℃
人胎盘羊膜间充质干细胞成骨分化试剂盒 试剂A：1.25mL；试剂B：1.25mL；试剂C：12.5uL；试剂D：12.5mL。 -20℃
茜素红染色液 10mL RT
四、使用说明
1、配液前30min左右，人胎盘羊膜间充质干细胞成骨分化试剂盒中试剂A、试剂B、试剂C和试剂D预先放置室温溶解，可短暂离心（2000g），以确保试剂能全部收集。
2、于超净台内无菌环境打开间充质干细胞成骨分化基础培养基和四种试剂的瓶/管盖。
3、将试剂A、试剂B、试剂C全部加入间充质干细胞成骨分化基础培养基中。可吸取少量基础培养基洗涤各试剂管，以确保四种试剂完全加入。
4、充分混匀后即可使用。
注：本试剂盒中的每个成分均为无菌分装，但为确保完全无菌，也可以将混合后的完全培养基进行再次过滤除菌（0.22 μm滤膜）。
五、产品稳定性及保存条件
1、间质干细胞成骨分化基础培养基置于2-8℃保存，保质期为1年；
2、人胎盘羊膜间充质干细胞成骨分化试剂盒置于-20℃保存，保质期为2年；
3、完全培养基配制好后于2-8℃保存，保质期为1个月。
4、茜素红染色液置于室温保存，保质期为2年。
5、保质期内使用。
6、避免反复冻融相关产品。
六、质量控制
人胎盘羊膜间充质干细胞成骨分化培养基已使用人胎盘羊膜间充质干细胞进行性能测试。
主要的鉴定标准包括：
1、无菌检测（细菌、真菌和支原体检测）
2、内毒素检测
3、渗透压检测
4、pH测试
七、产品使用示例
（以六孔板为例）实验操作流程：
1、人胎盘羊膜间充质干细胞置于37℃，5% CO2的培养箱中常规培养。
2、当细胞融合度达到80-90%时，用0.25%Trypsin-0.04%EDTA进行消化。
3、将消化下来的人胎盘羊膜间充质干细胞按照1×104 cells/cm2 的细胞密度接种在六孔板中，每孔加入2 mL完全培养基。
4、将细胞置于37℃，5% CO2的培养箱中进行培养。
5、当细胞融合度达到60%-70%时，小心吸弃旧培养基，加入2 mL配制好的人胎盘羊膜间质干细胞成骨分化完全培养基。
6、每隔3天换用新鲜的人胎盘羊膜间质干细胞成骨分化完全培养基（诱导分化两周后可改为每隔2天换液一次）。
7. 诱导3周左右，观察细胞的形态变化及生长情况，用茜素红进行染色。
注：为了避免诱导过程中间质干细胞出现漂浮现象，建议对成骨诱导使用的培养器皿表面进行明胶包被。
八、操作步骤
1、细胞接种60min前，加适量0.1%明胶到培养器皿中，能覆盖整个培养器皿底面的量即可。
2、将铺有0.1%明胶的培养器皿放置培养箱内。
3、60min后弃去明胶，待培养器皿晾干后，即可用于接种细胞。
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普诺赛 hUC-MSCs原代分离与鉴定全流程详解（组织贴块法）
机械损伤 剥离血管、去除羊膜及剪碎华通氏胶时应尽量减少不必要的机械损伤，同时充分清除残留血液，以降低对后续培养的影响。 贴块稳定：前期培养尤其关键 建议选择约3-5 mm3均一的组织块，块间预留合适间距，并尽量避免培养早期移动培养瓶。若培养约7天仍未观察到明显细胞迁出，应结合组织贴附情况、样本状态及培养条件排查原因，必要时重新贴块。 培养体系：慎用含血清的培养基 血清会促进细胞分化，对于需要维持细胞特定表型或开展功能研究的实验，建议使用经过培养验证的间充质干细胞无血清培养
远远比常规试剂盒提取高，更好的保留外泌体的活性和形态； 大规模提取是有参考的解决方案的，这两篇文献很好的做了阐释。 关键步骤 [1]： ● 收集条件培养基（CM）：收集神经母细胞瘤 N2a 和成肌细胞 C2C12 的培养基，经过低速离心和 0.22 μm 过滤去除大颗粒和细胞碎片。 ● 处理大体积培养基：对于大体积培养基（50 ml 至 200 mL），使用切向流过滤（TFF）系统进行浓缩和透析，然后加载到结合-洗脱分子筛层析（BE-SEC）柱上进行纯化。 ● 分离 EVs：根据 280 nm
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