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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
148
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
- 规格:
100ml
特别提示:包括DNA中和缓冲液Ⅰ在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNA中和缓冲液Ⅰ
产品货号:GL1294
产品规格:100ml
用途:
用于将DNA转移至不带电荷的膜上
注意事项:
由tris-hcl、氯化钠组成。
储存条件:室温,12个月
除了DNA中和缓冲液Ⅰ,,我公司还供应以下相关产品:
名称:人类cDNA
货号:WE0227
规格:100μl(20次反应)
本产品是以人胎盘组织RNA为模板,Oligo(dT)以及Random为引物, 用百奥莱博的高灵敏度的逆转录酶反转录得到的PCR即用型cDNA,可用于PCR实验的阳性对照。纯度:OD260/280≈1.8
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl体系 | 终浓度 |
| 10×Taq PCR Buffer with Mg2+ | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,2.5 mM each | 4μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Human Placenta cDNA | 5μl | |
| Taq DNA Polymerase,2.5 U/μl | 0.5μl | |
| RNase-Free Water | 补水至50μl |
注意:
1)引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)镁离子浓度请以终浓度1.5-3 mM作为设定范围的参考。本产品的10×PCR Buffer中已经含有15 mM镁离子,可根据丌同的引物对和模板来调节镁离子浓度,由此优化反应体系。
2、将混合好的液体进行PCR反应。
3、结果检测:反应结束后取5μl反应产物,加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
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文献和实验被有效裂解。解决方法:可用经典碱裂解法抽提质粒 DNA 方法中的 II 液替代 Solution II 使用。 3.出现严重的 RNA 污染? (1)未在 Solution I 中事先加入 RNase A1。解决方法:补加 RNase A1。 (2)加入 RNase A 1的 Solution I 长期保存于室温,导致 RNase A1 活性下降。 (3)细菌过量, RNase A1 不能有效降解 RNA。解决方法:将细菌用量减半或增加 RNase A1 在 Solution I 中
外周血DNA为模板,PCR扩增凝血因子FⅧ基因的583bp特异片段产物,其中包含MspⅠRFLP多态位点,经MspⅠ酶切后,琼脂糖凝胶电泳检测等位片段的长度(583 bp或360 bp+223 bp),以此为遗传标记进行连锁分析,判断胎儿是否得到了带有缺陷FⅧ基因的染色体,从而做出间接基因诊断。 二、材料及试剂 1. DNA(50ng/μl)、引物Ⅰ和Ⅱ(20 μΜ)、TaqDNA聚合酶(5 U/μl)10×PCR反应缓冲液、 dNTP(2.5 mM)、灭菌蒸馏水、液体石蜡、限制性内切酶MspⅠ
NaCl,然后缓慢加入 10 g CTAB (十六烷基三甲基溴化铵),同时加热并搅拌,可加热至 65℃ 溶解,定容终体积至 100 mL。3. CTAB 沉淀液: 1% (w/v) CTAB,50 mM Tris.Cl (pH8.0),10 mM EDTA(pH8.0)4. 高盐 TE 缓冲液: 10 mM Tris.Cl (pH8.0),0.1 mM EDTA (pH8.0),1M NaCl【实验方法与步骤】1. 在所需量的 CTAB 抽提液中加入 2-巯基乙醇,使终浓度达 2% (v/v
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