VTM运送培养基（病毒采样管）（不含抗生素）（配双拭子）

手把手教你做好体外 DNA 重组

苄青霉素及 140 g/mL X-gal。作为载体的质粒都含有一种或两种抗生素的耐药基因，当把这种质粒转入大肠杆菌后，此菌便获得了抵抗这种抗生素的能力。目前分子克隆所用的克隆载体多含氨苄青霉素耐药基因，所以涉及最多的是氨苄青霉素筛选。当将氨苄青霉素加入培养基中后，只有含质粒的细菌能够繁殖，而不含质粒的细菌则不能繁殖形成菌落。此种筛选不能鉴别重组质粒或自身环化的质粒。在用含氨苄青霉素耐药基因的质粒进行克隆时，转化平板培养基中要加入氨苄青霉素。（四）质粒和菌株的保存:1. 质粒可以在-20 ℃ 冰冻保存。2. 菌株

【交流】基因克隆知识问答及FAQ

限制酶时匹配不正确或者是载体和插入片段未磷酸化，PCR产物切割效率低，克隆时使用的工具酶受到污染等。(4) 空载体。载体自身环化切割不完全造成。(5) 结构不正确。非特异性PCR产物克隆，或者由于内切或外切核酸酶污染使得插入片段断裂。(6) 克隆的插入片段序列错误。PCR使用的DNA聚合酶保真性低，凝胶切割回收时DNA被UV光损害，PCR引物错误。(7) 克隆不含质粒。琼脂培养基中抗生素含量不够或者卫星克隆。Q8：怎样挑选阳性重组DNA？A8：1、将转化后的液体涂布于琼脂培养基表面，培养基中含有

细胞培养面面观

后高压灭菌20min，与其配套的瓶盖则洗净后另行包好同时灭菌、烘干。培养基过滤器灭菌同瓶子，也要在用完后及时洗净、灭菌时保持密封。Tip头就容易了，插到盒子里，双层牛皮纸包好后直接高压灭菌就好了。 2、再说说除菌：我说的除菌主要是指溶液的除菌。如PBS、HEPES之类的一些缓冲剂和不含葡萄糖的盐溶液，可以配好以后直接高压灭菌。而大部分的溶液由于成分限制必须过滤除菌。我们实验室需要过滤除菌的溶液有：胶原酶、胰酶、各类血清、抗生素、G-418溶液、各类培养基、各类生长因子、丙酮酸钠、谷氨