NEBNext DNA 双链片段化酶反应缓冲液 v2 #B0349S 6 x 1 ml . . . . . . ¥309
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NEBNext DNA 双链片段化酶反应缓冲液 v2 #B0349S 6 x 1 ml . . . . . . ¥309
特性
为二代测序制备双链 DNA 为构建文库制备双链 DNA 片段
概述
NEBNext DNA 双链片段化酶是时间依赖型酶,能根据不同作用时间将 dsDNA 切割成 50 - 1,000 bp 片段。NEBNext DNA 双链片段化酶由两种酶组成,一种酶随机的在 dsDNA 上产生切刻,另一种酶识别切刻处并在对链进行切割,产生 dsDNA 片段。所得 DNA 片段含有极短突出末端,5´ 含磷酸基,3´ 含羟基。经过文库制备及测序验证,NEBNext DNA 双链片段化酶具有随机切割特性。比较使用该酶与使用机械法制备的基因组 DNA 文库,测序结果没有显示偏嗜性,测序覆盖也无区别。
图 1:大肠杆菌基因组 DNA 的片段化。用 NEBNext DNA 双链片段化酶将大肠杆菌基因组 DNA 在对应的时间内进行片段化,再用 MinElute ® 柱纯化。
来源
NEBNext DNA 双链片段化酶来源于两种不同 E. coli:一种融合表达有 MBP 和创伤弧菌核酸酶突变蛋白质(Vibrio vulnificus nuclease mutant protein),另一种融合表达有 MBP 和 T7 核酸内切酶突变蛋白质。
反应条件
1X NEBNext DNA 双链片段化酶反应缓冲液 v2,需要时可以加入 100 μM MgCl2,37℃ 温育。