- 询价
- ATCC/DSMZ/RCB/国内细胞库
- 中国/美国/德国/日本
- QCB1220
- 2025年07月09日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1×10^6 细胞数/ml
- 相关疾病：
见说明书
- 细胞形态：
见说明书
- 器官来源：
见说明书
- 运输方式：
复苏或冻存运输
- 年限：
P4代细胞
- 生长状态：
贴壁/悬浮
培养条件：DMEM+10% FBS；37℃，5% CO2
生长状态：贴壁
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备培养基；北美胎牛血清，10%；双抗1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
1. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
2. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
3. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。 下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置数小时（4h左右），稳定细胞状态，切忌在温箱内静置过夜。
3. 静置后镜检，拍照，记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。
4. 贴壁细胞：若细胞密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，收集细胞瓶内的培养基，留8ml继续培养至80%左右再传代，瓶盖可稍微拧松。
5. 细胞瓶内的培养基含血清和双抗，可收集后4℃保存备用，可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基，一半用客户自备的培养基，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应而造成生长状态不佳。
6. 细胞胰酶消化液建议使用PBS配制，
7. 因为细胞培养过程外因太多，所以我们的售后保障期为一周，超过一周的细胞我们会酌情处理，但不提供免费更换服务。 细胞运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验重大突破！西湖大学蔡尚团队首次证实细菌是乳腺癌转移的「重要帮凶」
体外液流压力系统来模拟血管中的流体剪切压力。在这个模拟循环系统中，在生理范围内，肿瘤细胞随着压力的增加，细胞活力逐渐下降。但是，有细菌的细胞比没有细菌的细胞显示出更高的存活率。更重要的是，有细菌的活细胞在平板上粘附和扩散的更好，而且比对照组要大得多，这表明细菌的加入使细胞骨架和附着能力发生了显著改变，而这种改变可能是细菌的存在重塑了肿瘤的细胞骨架，以使其更好地生存。 图片来源：Cell 人类乳腺癌组织中微生物群的表征 最后，他们还收集了乳腺癌病人的肿瘤组织、癌旁组织和淋巴结组织探究了原发肿瘤和转移
肿瘤转移作为肿瘤致死性的核心驱动因素，是恶性肿瘤最具特征性的生物学行为之一，其分子机制与临床意义极为复杂。这一过程呈现多步骤、动态级联的特征：起始于原发灶肿瘤细胞的侵袭脱离，随后通过侵入循环系统形成循环肿瘤细胞（CTCs），继而在远处器官完成定植、适应新微环境并最终形成转移灶。在此过程中，肿瘤细胞需连续突破多重生理与免疫屏障，包括跨血管壁穿透、逃避机体免疫监视及适应异质性的远端微环境等。 转移潜能细胞通常具备更高的表型可塑性与环境适应能力，甚至可进入休眠状态以规避免疫攻击和治疗压力，部分病例
Nature：癌症疫苗新突破！调动 T 细胞与 NK 细胞的双重攻击，全面杀灭癌细胞
免疫 4 个月后，他们用肿瘤细胞重新攻击无肿瘤小鼠，发现其可完全受到保护。 另外，利用两个自发转移模型，B16-BL6 黑色素瘤模型和 4T1 三阴性乳腺癌模型。他们发现在切除原发肿瘤后，小鼠在接种了 MICB-vax 或 Ctrl-vax 后，MICB-vax 可显著降低两种模型术后 1 个月以上的肺转移数量。肺组织切片的组织学分析进一步表明，与 Ctrl-vax 相比，MICB-vax 可显著减少转移数量和转移大小。 他们还在恒河猴中检测了疫苗的安全性和免疫原性，发现抗 MICA 和抗 MICB
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
