- 询价
- ATCC/DSMZ/RCB/国内细胞库
- 中国/美国/德国/日本
- QCB929
- 2025年07月12日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1×10^6 细胞数/ml
- 相关疾病：
见说明书
- 细胞形态：
见说明书
- 器官来源：
见说明书
- 运输方式：
复苏或冻存运输
- 年限：
P4代细胞
- 生长状态：
贴壁/悬浮
培养条件：DMEM+10% FBS；37℃，5% CO2
生长状态：贴壁
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备培养基；北美胎牛血清，10%；双抗1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 对于贴壁细胞，传代可参考以下方法： 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
1. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
2. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
3. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。 下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置数小时（4h左右），稳定细胞状态，切忌在温箱内静置过夜。
3. 静置后镜检，拍照，记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。
4. 贴壁细胞：若细胞密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，收集细胞瓶内的培养基，留8ml继续培养至80%左右再传代，瓶盖可稍微拧松。
5. 细胞瓶内的培养基含血清和双抗，可收集后4℃保存备用，可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基，一半用客户自备的培养基，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应而造成生长状态不佳。
6. 细胞胰酶消化液建议使用PBS配制，
7. 因为细胞培养过程外因太多，所以我们的售后保障期为一周，超过一周的细胞我们会酌情处理，但不提供免费更换服务。 T细胞运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验2-3次，将黏膜剪成约1mm3 大小的组织块。 2. 将植块放入培养皿中，上皮面朝下；也可在培养皿内放入盖玻片，将组织块放在盖玻片上培养。 3. 当组织块贴壁后，加入适量培养液，培养液的量为能湿润组织块但不使组织块浮起为宜，在37℃、5%CO2 培养箱内静置培养。 4. 组织块贴壁1-3d后，补充培养液。以后每隔2-3d换液1次。 5. 植块培养3d后，细胞从植块边缘迁出。1周后，细胞向外迁移扩展，并逐渐分化，细胞的形态逐渐趋向正常食管黏膜上皮细胞
单细胞测序技术（scRNA-Seq）之 NCB 高分文章解析前列腺癌相关研究
单细胞转录组测序，注释细胞类型主要包括上皮细胞、单核-巨噬细胞系、T细胞、内皮细胞、成纤维细胞、肥大细胞等主要群体。然后分别对每个大群进一步分析。 13 例前列腺癌样本的单细胞研究概况 （1）与肿瘤预后相关的上皮细胞类型 通过拷贝数变异分析、肿瘤细胞的marker基因/ 信号通路相关性分析，将上皮细胞鉴定为 luminal types、cell-cycle 、basal/intermediate 类型；我们主要研究了这些细胞类型与临床预后的关系，发现特异性表达细胞因子 CCL2 的basal
厦门大学药物科学学院的研究团队已经发现表皮生长因子受体（EGFR）在三阴乳腺癌肿瘤位置高表达，并设计了靶向EGFR 的第三代 CAR 结构。随后用 EGFR CAR 慢病毒（EGFR CAR-T）感染原代T淋巴细胞生产 CAR-T，分别在体外和体内评估了 CAR-T 对 TNBC 的疗效。通过RNA测序分析揭示了 EGFR CAR-T 细胞中激活的信号通路情况。 结果发现：第三代 EGFR CAR-T 细胞在体外对 TNBC 肿瘤细胞有很强的特异性抑制作用，而对正常的乳腺上皮细胞或雌激素
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
