蛋白胶中量回收试剂盒

产品及特点 十二烷基硫酸钠-聚酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）不仅可用于检测蛋
白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白
质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、
氨基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门为此用途开发的中量蛋
白胶回收法，它具有下列特点：
1. 简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。
2. 适用于变性胶（SDS-PAGE）和非变性胶。
3. 每次可以处理 1 g 的 PAGE 胶（具体多少蛋白质取决于上样的浓度）。
4. 回收率一般在 50-90%之间（跟蛋白质大小，洗脱时间相关）。
5. 跟后续的实验兼容，包括 2-D 电泳、质谱测序等。
规格及成分 成 份 编 号 5 次包装
溶液 A 90403A 5 mL
溶液 B 90403B 50 mL
20mL 塑料注射器 5 只
使用手册 90403sc 1 份

运输及保存 常温运输，4℃保存，有效期一年。
自备试剂 无
使用方法 1. 按常规方法进行变性（SDS-PAGE）或非变性蛋白电泳。
2. 切取含目的蛋白的胶（尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率）。
注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电
泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整
体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区
域，并切下此区域的胶进行回收。
3. 将切下的、重量不超过 1 克的胶块转移到 30 mL 塑料注射器中。
4. 用塑料注射器推杆将胶块从端口挤压出去，使之变成细小的碎片，用自备
的 15mL 塑料离心管收集这些破碎的凝胶颗粒。
5. 加入 1 mL 溶液 A，4℃摇晃洗脱至少 2-16 小时（过夜）。此时最好将将
要使用的溶液 B 放在冰箱预冷。
6. 10,000 g 离心 10 分钟，转移上清到新的 10-15mL 的塑料离心管中，注
意不要吸取碎胶。
7. 加入 5 倍体积的预冷的溶液 B，摇晃混匀。
8. -20℃放置至少 10-30 分钟。
9. 室温 12,000 g（注意：一定要检查使用的离心管是否能够耐受次离心力，
如果不能建议将溶液分到 1.5 mL 的塑料离心管中再进行离心处理）离心
5-20 分钟，弃上清。
10.室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适
当的缓冲液中，可用于后续实验（2-D 电泳、质谱测序等）。