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- 详细信息
- 技术资料
- 保质期:
一年
- 供应商:
钦诚生物
- 保存条件:
室温
- 规格:
50次
本产品是基于经典离心法的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽 类)抗凝全血中提取基因组 DNA 的试剂。具有下列特点:
1. DNA 纯净,OD260/OD280 在 1.8-2.0 之间,可直接用于 PCR、酶切、 杂交等实验。DNA 产量一般在 30-50 ug/mL 全血。
2. 操作简单,整个过程约 15 分钟,室温操作,适合大规模样品处理。
3. 一次的血液处理量最多可达 5 mL,不需要柱子,不会发生其他同类产品 经常发生的堵塞现象。
4. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格只有其一半左右。
5. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分 成 份 编 号 小扁盒包装 红细胞裂解液 A 型 60403 100 mL 溶液 A 3671A 30 mL 溶液 B 3671B 15 mL 使用手册 3671sc 1 份
运输及保存 运输及保存,有效期一年。 使用方法 1. 在装有抗凝血液的离心管中,按 1:1 的比例加入红细胞裂解液 A 型并 轻柔颠倒混匀。 2. 5000-10000 g 室温离心 2 分钟,小心吸弃弃上清。 3. 将沉淀重悬于 1/2 体积(按最初血液的体积计算)的红细胞裂解液 A 型 中,轻柔吹打混匀后 5000-10000 g 室温离心 2 分钟。 4. 小心弃去上清,沉淀即为去除了红细胞和白细胞胞浆的白细胞细胞核。 5. 在白细胞细胞核中加入 0.6 mL 溶液 A(溶液 A 用前需要充分摇匀), 用移液枪轻柔吹打混匀(剧烈吹打会打断 DNA)。 6. 68℃水浴 10 分钟(此步可省略,但产量略有降低)。 7. 加入 0.2 mL 氯仿和 0.3 mL 溶液 B,立即小心颠倒混匀。 8. 室温 13000-15000 g 离心 3 分钟,小心将上清(约 0.7 mL)转移至一 新的 1.5 mL 塑料离心管中。,轻柔颠倒混匀 5-8 次,此时一般会出现絮 状 DNA 沉淀。DNA 可以用下列方法之一回收。 10. 方法一:可以用枪头将絮状 DNA 挑出,放在 1 mL 75%乙醇中几十秒 使其中的盐离子进入乙醇中,然后再挑出 DNA,在空气中放半分钟使乙 醇挥发,再转移到 0.1-0.3 mL 自备的 TE 缓冲液中溶解过夜(大分子的 DNA 需要长时间才能彻底溶解)。 11. 方法二:室温 13000-15000 g 离心 1 分钟,去尽上清。在 DNA 沉淀 中加入 75%乙醇,震荡后室温 13000-15000 g 离心 1 分钟,去尽上清 (含盐离子)。重复 75%乙醇洗涤一次。短暂离心,去尽残留 75%乙 醇(此步十分重要,不要省略,否则乙醇会影响 DNA 的溶解和后续的使 用),最后在 DNA 沉淀中加入 0.1-0.3 mL 自备的 TE 缓冲液过夜溶解 DNA 待用。
1. DNA 纯净,OD260/OD280 在 1.8-2.0 之间,可直接用于 PCR、酶切、 杂交等实验。DNA 产量一般在 30-50 ug/mL 全血。
2. 操作简单,整个过程约 15 分钟,室温操作,适合大规模样品处理。
3. 一次的血液处理量最多可达 5 mL,不需要柱子,不会发生其他同类产品 经常发生的堵塞现象。
4. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格只有其一半左右。
5. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分 成 份 编 号 小扁盒包装 红细胞裂解液 A 型 60403 100 mL 溶液 A 3671A 30 mL 溶液 B 3671B 15 mL 使用手册 3671sc 1 份
运输及保存 运输及保存,有效期一年。 使用方法 1. 在装有抗凝血液的离心管中,按 1:1 的比例加入红细胞裂解液 A 型并 轻柔颠倒混匀。 2. 5000-10000 g 室温离心 2 分钟,小心吸弃弃上清。 3. 将沉淀重悬于 1/2 体积(按最初血液的体积计算)的红细胞裂解液 A 型 中,轻柔吹打混匀后 5000-10000 g 室温离心 2 分钟。 4. 小心弃去上清,沉淀即为去除了红细胞和白细胞胞浆的白细胞细胞核。 5. 在白细胞细胞核中加入 0.6 mL 溶液 A(溶液 A 用前需要充分摇匀), 用移液枪轻柔吹打混匀(剧烈吹打会打断 DNA)。 6. 68℃水浴 10 分钟(此步可省略,但产量略有降低)。 7. 加入 0.2 mL 氯仿和 0.3 mL 溶液 B,立即小心颠倒混匀。 8. 室温 13000-15000 g 离心 3 分钟,小心将上清(约 0.7 mL)转移至一 新的 1.5 mL 塑料离心管中。,轻柔颠倒混匀 5-8 次,此时一般会出现絮 状 DNA 沉淀。DNA 可以用下列方法之一回收。 10. 方法一:可以用枪头将絮状 DNA 挑出,放在 1 mL 75%乙醇中几十秒 使其中的盐离子进入乙醇中,然后再挑出 DNA,在空气中放半分钟使乙 醇挥发,再转移到 0.1-0.3 mL 自备的 TE 缓冲液中溶解过夜(大分子的 DNA 需要长时间才能彻底溶解)。 11. 方法二:室温 13000-15000 g 离心 1 分钟,去尽上清。在 DNA 沉淀 中加入 75%乙醇,震荡后室温 13000-15000 g 离心 1 分钟,去尽上清 (含盐离子)。重复 75%乙醇洗涤一次。短暂离心,去尽残留 75%乙 醇(此步十分重要,不要省略,否则乙醇会影响 DNA 的溶解和后续的使 用),最后在 DNA 沉淀中加入 0.1-0.3 mL 自备的 TE 缓冲液过夜溶解 DNA 待用。
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