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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 供应商:
钦诚生物
- 规格:
5ug
基本信息
| 启动子: | IFN gamma |
|---|---|
| 复制子: | pUC ori,f1 ori |
| 质粒分类: | 哺乳细胞, Luciferase质粒 |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧 LB |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导,瞬时表达 |
| 5'测序引物: | RVP3:CTAGCAAAATAGGCTGTCCC |
| 3'测序引物: | LucNrev |
质粒简介
PGL3-3.6kb human IFN - Gama Luc - resistência do núcleo de ampicilina a 37 °c, temperatura, tensão do (s) DH5alpha high copy, copy number, vector TEM promotor que TEM 5 '3' RVprimer3 TEM primer, primer LucNrev
质粒图谱
pGL3-3.6kb human IFN-gamma luc 哺乳报告质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pGL3-3.6kb human IFN-gamma luc 哺乳报告质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验panzerking 我在设计实验 想用NF-kB-luc做报告基因 是不是一定要用β-galactosidase 报告质粒或者Renilla荧光素酶报告质粒作为内参? 我看了有些文献 好像有的用 有的一个都没用 是有这样的情况吗 或者是不是只要保证control组NF-kB-luc转染条件一样就可以做为可用的数据了? lwjssry 不可以,一定要用内参,需要校正对照和处理组细胞数目的差异
【求助】请教荧光素酶报告基因检测NF-KB转录活性需要哪些试剂?
阿兰梦 之前没有做过,只是根据文献的简单描述依葫芦画瓢,但是毕竟是好几千的试剂,生怕弄错了 临床医生一下子做科研,确实很多地方不懂,很艰难 目的是想用双荧光素酶报告基因的方法检测药物内皮细胞的NF-KB的转录活性影响,需要买pNF-kB-Luc 报告质粒,碧云天有;然后需要双荧光素酶报告基因检测系统,promega有;另外还需要一个内参,文献是β-半乳糖苷酶 问题是: 1、不知道买哪一个对: http://www
哺乳动物RNAi技术 Mammalian RNA Interference
the user to define sequence motifs and G/C content, to search siRNAs against the human and mouse genome databases to prevent mistargeting, and to exclude single-nucleotide polymorphic sites. PROCEDURE
技术资料暂无技术资料 索取技术资料




