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pREDKI大肠敲除质粒

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  • ¥1000
  • 钦诚生物
  • 上海
  • QC2837
  • 2025年07月10日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      负20度

    • 保质期

      2年

    • 供应商

      钦诚生物

    • 规格

      5ug

    基本信息

    别名: (Plasmid #51626);I-SceI
    复制子: pSC101 ori
    原核抗性: 卡那霉素Kan
    克隆菌株: 大肠杆菌DH5α
    培养条件: LB培养基/30℃

    质粒简介


    pREDKI大肠敲除质粒

    质粒图谱


    产品细节图片1

    质粒序列


    LOCUS       Exported                9028 bp ds-DNA     circular SYN 20-AUG-2018
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    KEYWORDS    pREDKI
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 9028)
      AUTHORS   .
      TITLE     Direct Submission
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..9028
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         CDS             complement(19..897)
                         /codon_start=1
                         /gene="araC"
                         /product="L-arabinose regulatory protein"
                         /note="araC"
                         /translation="MAEAQNDPLLPGYSFNAHLVAGLTPIEANGYLDFFIDRPLGMKGY
                         ILNLTIRGQGVVKNQGREFVCRPGDILLFPPGEIHHYGRHPEAREWYHQWVYFRPRAYW
                         HEWLNWPSIFANTGFFRPDEAHQPHFSDLFGQIINAGQGEGRYSELLAINLLEQLLLRR
                         MEAINESLHPPMDNRVREACQYISDHLADSNFDIASVAQHVCLSPSRLSHLFRQQLGIS
                         VLSWREDQRISQAKLLLSTTRMPIATVGRNVGFDDQLYFSRVFKKCTGASPSEFRAGCE
                         EKVNDVAVKLS"
         promoter        924..1208
                         /gene="araBAD"
                         /note="araBAD promoter"
                         /note="promoter of the L-arabinose operon of E. coli; the 
                         araC regulatory gene is transcribed in the opposite 
                         direction (Guzman et al., 1995)"
         RBS             1235..1243
                         /note="Shine-Dalgarno sequence"
                         /note="full consensus sequence for ribosome-binding sites 
                         upstream of start codons in E. coli; complementary to a 
                         region in the 3' end of the 16S rRNA (Chen et al., 1994)"
         CDS             1252..1668
                         /codon_start=1
                         /gene="gam"
                         /product="inhibitor of the host RecBCD nuclease in the 
                         lambda Red system"
                         /note="Gam"
                         /note="protects the double-stranded DNA substrate for 
                         recombination"
                         /translation="MDINTETEIKQKHSLTPFPVFLISPAFRGRYFHSYFRSSAMNAYY
                         IQDRLEAQSWARHYQQLAREEKEAELADDMEKGLPQHLFESLCIDHLQRHGASKKSITR
                         AFDDDVEFQERMAEHIRYMVETIAHHQVDIDSEV"
         CDS             1674..2459
                         /codon_start=1
                         /gene="bet"
                         /product="single-stranded DNA binding recombinase in the 
                         lambda Red system"
                         /note="Beta"
                         /note="mediates pairing of a single-stranded DNA with a 
                         complementary target"
                         /translation="MSTALATLAGKLAERVGMDSVDPQELITTLRQTAFKGDASDAQFI
                         ALLIVANQYGLNPWTKEIYAFPDKQNGIVPVVGVDGWSRIINENQQFDGMDFEQDNESC
                         TCRIYRKDRNHPICVTEWMDECRREPFKTREGREITGPHPKRMLRHKAMIQCARLA
                         FGFAGIYDKDEAERIVENTAYTAERQPERDITPVNDETMQEINTLLIALDKTWDDDLLP
                         LCSQIFRRDIRASSELTQAEAVKALGFLKQKAAEQKVAA"
         CDS             2456..3136
                         /codon_start=1
                         /gene="exo"
                         /product="5' to 3' double-stranded DNA exonuclease in the 
                         lambda Red system"
                         /note="Exo"
                         /note="creates 3' single-stranded DNA tails"
                         /translation="MTPDIILQRTGIDVRAVEQGDDAWHKLRLGVITASEVHNVIAKPR
                         SGKKWPDMKMSYFHTLLAEVCTGVAPEVNAKALAWGKQYENDARTLFEFTSGVNVTESP
                         IIYRDESMRTACSPDGLCSDGNGLELKCPFTSRDFMKFRLGGFEAIKSAYMAQVQYSMW
                         VTRKNAWYFANYDPRMKREGLHYVVIERDEKYMASFDEIVPEFIEKMDEALAEIGFVFG
                         EQWR"
         terminator      3137..3381
                         /note="lambda tL3 terminator"
                         /note="transcription terminator tL3 from phage lambda"
         CDS             complement(3414..4262)
                         /codon_start=1
                         /gene="E. coli rhaR"
                         /product="transcriptional activator of rhaR and rhaS"
                         /note="rhaR"
                         /note="needed for rhamnose-dependent activation of the rhaB
                         promoter"
                         /translation="MAHQLKLLKDDFFASDQQAVAVADRYPQDVFAEHTHDFCELVIVW
                         RGNGLHVLNDRPYRITRGDLFYIHADDKHSYASVNDLVLQNIIYCPERLKLNLDWQGAI
                         PGFNASAGQPHWRLGSMGMAQARQVIGQLEHESSQHVPFANEMAELLFGQLVMLLNRHR
                         YTSDSLPPTSSETLLDKLITRLAASLKSPFALDKFCDEASCSERVLRQQFRQQTGMTIN
                         QYLRQVRVCHAQYLLQHSRLLISDISTECGFEDSNYFSVVFTRETGMTPSQWRHLNSQK
                         D"
         CDS             complement(4336..5172)
                         /codon_start=1
                         /gene="E. coli rhaS"
                         /product="positive regulator of the rhaB promoter"
                         /note="rhaS"
                         /note="activated by L-rhamnose"
                         /translation="MTVLHSVDFFPSGNASVAIEPRLPQADFPEHHHDFHEIVIVEHGT
                         GIHVFNGQPYTITGGTVCFVRDHDRHLYEHTDNLCLTNVLYRSPDRFQFLAGLNQLLPQ
                         ELDGQYPSHWRVNHSVLQQVRQLVAQMEQQEGENDLPSTASREILFMQLLLLLRKSSLQ
                         ENLENSASRLNLLLAWLEDHFADEVNWDAVADQFSLSLRTLHRQLKQQTGLTPQRYLNR
                         LRLMKARHLLRHSEASVTDIAYRCGFSDSNHFSTLFRREFNWSPRDIRQGRDGFLQ"
         promoter        5318..5436
                         /note="rhaB promoter"
                         /note="promoter of the E. coli rhaBAD operon, conferring 
                         tight induction with L-rhamnose and repression with 
                         D-glucose in the presence of RhaR and RhaS (Giacalone et 
                         al., 2006)"
         CDS             5459..6094
                         /codon_start=1
                         /note="I-SceI"
                         /translation="MHQKNQVMNLGPNSKLLKEYKSQLIELNIEQFEAGIGLILGDAYI
                         RSRDEGKTYCMQFEWKNKAYMDHVCLLYDQWVLSFKHQAFNKLANLFIVNNKKTIPNNL
                         VENYLTPMSLAYWFMDDGGKWDYNKNSTNKSIVLNTQSFTFEEVEYLVKGLRNKFQLNC
                         YVKINKNKPIIYIDSMSYLIFYNLIKPYLIPQMMYKLPNTISSETFLK"
         CDS             complement(6205..7155)
                         /codon_start=1
                         /gene="rep101"
                         /product="RepA protein needed for replication with the 
                         pSC101 origin"
                         /note="Rep101"
                         /translation="MSELVVFKANELAISRYDLTEHETKLILCCVALLNPTIENPTRKE
                         RTVSFTYNQYAQMMNISRENAYGVLAKATRELMTRTVEIRNPLVKGFEIFQWTNYAKFS
                         SEKLELVFSEEILPYLFQLKKFIKYNLEHVKSFENKYSMRIYEWLLKELTQKKTHKANI
                         EISLDEFKFMLMLENNYHEFKRLNQWVLKPISKDLNTYSNMKLVVDKRGRPTDTLIFQV
                         ELDRQMDLVTELENNQIKMNGDKIPTTITSDSYLRNGLRKTLHDALTAKIQLTSFEAKF
                         LSDMQSKYDLNGSFSWLTQKQRTTLENILAKYGRI"
         rep_origin      7203..7425
                         /note="pSC101 ori"
                         /note="low-copy replication origin that requires the Rep101
                         protein"
         CDS             8191..9006
                         /codon_start=1
                         /gene="aph(3')-Ia"
                         /product="aminoglycoside phosphotransferase"
                         /note="KanR"
                         /note="confers resistance to kanamycin in bacteria or G418 
                         (Geneticin(R)) in eukaryotes"
                         /translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG
                         KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
                         TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA
                         SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI
                         ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"
    ORIGIN
            1 aaatggttta aacatttatt atgacaactt gacggctaca tcattcactt tttcttcaca
           61 accggcacgg aactcgctcg ggctggcccc ggtgcatttt ttaaataccc gcgagaaata
          121 gagttgatcg tcaaaaccaa cattgcgacc gacggtggcg ataggcatcc gggtggtgct
          181 caaaagcagc ttcgcctggc tgatacgttg gtcctcgcgc cagcttaaga cgctaatccc
          241 taactgctgg cggaaaagat gtgacagacg cgacggcgac aagcaaacat gctgtgcgac
          301 gctggcgata tcaaaattgc tgtctgccag gtgatcgctg atgtactgac aagcctcgcg
          361 tacccgatta tccatcggtg gatggagcga ctcgttaatc gcttccatgc gccgcagtaa
          421 caattgctca agcagattta tcgccagcag ctccgaatag cgcccttccc cttgcccggc
          481 gttaatgatt tgcccaaaca ggtcgctgaa atgcggctgg tgcgcttcat ccgggcgaaa
          541 gaaccccgta ttggcaaata ttgacggcca gttaagccat tcatgccagt aggcgcgcgg
          601 acgaaagtaa acccactggt gataccattc gcgagcctcc ggatgacgac cgtagtgatg
          661 aatctctcct ggcgggaaca gcaaaatatc acccggtcgg caaacaaatt ctcgtccctg
          721 atttttcacc accccctgac cgcgaatggt gagattgaga atataacctt tcattcccag
          781 cggtcggtcg ataaaaaaat cgagataacc gttggcctca atcggcgtta aacccgccac
          841 cagatgggca ttaaacgagt atcccggcag caggggatca ttttgcgctt cagccatact
          901 tttcatactc ccgccattca gagaagaaac caattgtcca tattgcatca gacattgccg
          961 tcactgcgtc ttttactggc tcttctcgct aaccaaaccg gtaaccccgc ttattaaaag
         1021 cattctgtaa caaagcggga ccaaagccat gacaaaaacg cgtaacaaaa gtgtctataa
         1081 tcacggcaga aaagtccaca ttgattattt gcacggcgtc acactttgct atgccatagc
         1141 atttttatcc ataagattag cggatcctac ctgacgcttt ttatcgcaac tctctactgt
         1201 ttctccatac ccgttttttt gggaattcga gctctaagga ggttataaaa aatggatatt
         1261 aatactgaaa ctgagatcaa gcaaaagcat tcactaaccc cctttcctgt tttcctaatc
         1321 agcccggcat ttcgcgggcg atattttcac agctatttca ggagttcagc catgaacgct
         1381 tattacattc aggatcgtct tgaggctcag agctgggcgc gtcactacca gcagctcgcc
         1441 cgtgaagaga aagaggcaga actggcagac gacatggaaa aaggcctgcc ccagcacctg
         1501 tttgaatcgc tatgcatcga tcatttgcaa cgccacgggg ccagcaaaaa atccattacc
         1561 cgtgcgtttg atgacgatgt tgagtttcag gagcgcatgg cagaacacat ccggtacatg
         1621 gttgaaacca ttgctcacca ccaggttgat attgattcag aggtataaaa cgaatgagta
         1681 ctgcactcgc aacgctggct gggaagctgg ctgaacgtgt cggcatggat tctgtcgacc
         1741 cacaggaact gatcaccact cttcgccaga cggcatttaa aggtgatgcc agcgatgcgc
         1801 agttcatcgc attactgatc gttgccaacc agtacggcct taatccgtgg acgaaagaaa
         1861 tttacgcctt tcctgataag cagaatggca tcgttccggt ggtgggcgtt gatggctggt
         1921 cccgcatcat caatgaaaac cagcagtttg atggcatgga ctttgagcag gacaatgaat
         1981 cctgtacatg ccggatttac cgcaaggacc gtaatcatcc gatctgcgtt accgaatgga
         2041 tggatgaatg ccgccgcgaa ccattcaaaa ctcgcgaagg cagagaaatc acggggccgt
         2101 ggcagtcgca tcccaaacgg atgttacgtc ataaagccat gattcagtgt gcccgtctgg
         2161 ccttcggatt tgctggtatc tatgacaagg atgaagccga gcgcattgtc gaaaatactg
         2221 catacactgc agaacgtcag ccggaacgcg acatcactcc ggttaacgat gaaaccatgc
         2281 aggagattaa cactctgctg atcgccctgg ataaaacatg ggatgacgac ttattgccgc
         2341 tctgttccca gatatttcgc cgcgacattc gtgcatcgtc agaactgaca caggccgaag
         2401 cagtaaaagc tcttggattc ctgaaacaga aagccgcaga gcagaaggtg gcagcatgac
         2461 accggacatt atcctgcagc gtaccgggat cgatgtgaga gctgtcgaac agggggatga
         2521 tgcgtggcac aaattacggc tcggcgtcat caccgcttca gaagttcaca acgtgatagc
         2581 aaaaccccgc tccggaaaga agtggcctga catgaaaatg tcctacttcc acaccctgct
         2641 tgctgaggtt tgcaccggtg tggctccgga agttaacgct aaagcactgg cctggggaaa
         2701 acagtacgag aacgacgcca gaaccctgtt tgaattcact tccggcgtga atgttactga
         2761 atccccgatc atctatcgcg acgaaagtat gcgtaccgcc tgctctcccg atggtttatg
         2821 cagtgacggc aacggccttg aactgaaatg cccgtttacc tcccgggatt tcatgaagtt
         2881 ccggctcggt ggtttcgagg ccataaagtc agcttacatg gcccaggtgc agtacagcat
         2941 gtgggtgacg cgaaaaaatg cctggtactt tgccaactat gacccgcgta tgaagcgtga
         3001 aggcctgcat tatgtcgtga ttgagcggga tgaaaagtac atggcgagtt ttgacgagat
         3061 cgtgccggag ttcatcgaaa aaatggacga ggcactggct gaaattggtt ttgtatttgg
         3121 ggagcaatgg cgatgacgca tcctcacgat aatatccggg taggcgcaat cactttcgtc
         3181 tactccgtta caaagcgagg ctgggtattt cccggccttt ctgttatccg aaatccactg
         3241 aaagcacagc ggctggctga ggagataaat aataaacgag gggctgtatg cacaaagcat
         3301 cttctgttga gttaagaacg agtatcgaga tggcacatag ccttgctcaa attggaatca
         3361 ggtttgtgcc aataccagta gaaacagacg aagaatccat ggggcatggc gaattaatct
         3421 ttctgcgaat tgagatgacg ccactggctg ggcgtcatcc cggtttcccg ggtaaacacc
         3481 accgaaaaat agttactatc ttcaaagcca cattcggtcg aaatatcact gattaacagg
         3541 cggctatgct ggagaagata ttgcgcatga cacactctga cctgtcgcag atattgattg
         3601 atggtcattc cagtctgctg gcgaaattgc tgacgcaaaa cgcgctcact gcacgatgcc
         3661 tcatcacaaa atttatccag cgcaaaggga cttttcaggc tagccgccag ccgggtaatc
         3721 agcttatcca gcaacgtttc gctggatgtt ggcggcaacg aatcactggt gtaacgatgg
         3781 cgattcagca acatcaccaa ctgcccgaac agcaactcag ccatttcgtt agcaaacggc
         3841 acatgctgac tactttcatg ctcaagctga ccgataacct gccgcgcctg cgccatcccc
         3901 atgctaccta agcgccagtg tggttgccct gcgctggcgt taaatcccgg aatcgccccc
         3961 tgccagtcaa gattcagctt cagacgctcc gggcaataaa taatattctg caaaaccaga
         4021 tcgttaacgg aagcgtagga gtgtttatcg tcagcatgaa tgtaaaagag atcgccacgg
         4081 gtaatgcgat aagggcgatc gttgagtaca tgcaggccat taccgcgcca gacaatcacc
         4141 agctcacaaa aatcatgtgt atgttcagca aagacatctt gcggataacg gtcagccaca
         4201 gcgactgcct gctggtcgct ggcaaaaaaa tcatctttga gaagttttaa ctgatgcgcc
         4261 accgtggcta cctcggccag agaacgaagt tgattattcg caatatggcg tacaaatacg
         4321 ttgagaagat tcgcgttatt gcagaaagcc atcccgtccc tggcgaatat cacgcggtga
         4381 ccagttaaac tctcggcgaa aaagcgtcga aaagtggtta ctgtcgctga atccacagcg
         4441 ataggcgatg tcagtaacgc tggcctcgct gtggcgtagc agatgtcggg ctttcatcag
         4501 tcgcaggcgg ttcaggtatc gctgaggcgt cagtcccgtt tgctgcttaa gctgccgatg
         4561 tagcgtacgc agtgaaagag aaaattgatc cgccacggca tcccaattca cctcatcggc
         4621 aaaatggtcc tccagccagg ccagaagcaa gttgagacgt gatgcgctgt tttccaggtt
         4681 ctcctgcaaa ctgcttttac gcagcaagag cagtaattgc ataaacaaga tctcgcgact
         4741 ggcggtcgag ggtaaatcat tttccccttc ctgctgttcc atctgtgcaa ccagctgtcg
         4801 cacctgctgc aatacgctgt ggttaacgcg ccagtgagac ggatactgcc catccagctc
         4861 ttgtggcagc aactgattca gcccggcgag aaactgaaat cgatccggcg agcgatacag
         4921 cacattggtc agacacagat tatcggtatg ttcatacaga tgccgatcat gatcgcgtac
         4981 gaaacagacc gtgccaccgg tgatggtata gggctgccca ttaaacacat gaatacccgt
         5041 gccatgttcg acaatcacaa tttcatgaaa atcatgatga tgttcaggaa aatccgcctg
         5101 cgggagccgg ggttctatcg ccacggacgc gttaccagac ggaaaaaaat ccacactatg
         5161 taatacggtc atactggcct cctgatgtcg tcaacacggc gaaatagtaa tcacgaggtc
         5221 aggttcttac cttaaatttt cgacggaaaa ccacgtaaaa aacgtcgatt tttcaagata
         5281 cagcgtgaat tttcaggaaa tgcggtgagc atcacatcac cacaattcag caaattgtga
         5341 acatcatcac gttcatcttt ccctggttgc caatggccca ttttcctgtc agtaacgaga
         5401 aggtcgcgaa ttcaggcgct ttttagactg gtcgtaatga aattcagcag gatcacatat
         5461 gcatcaaaaa aaccaggtaa tgaacctggg tccgaactct aaactgctga aagaatacaa
         5521 atcccagctg atcgaactga acatcgaaca gttcgaagca ggtatcggtc tgatcctggg
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