- ¥800 - 1500
- 钦诚生物
- 上海
- QC5385
- 2025年07月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
2UG/5UG
| 规格： | 2UG | 产品价格： | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5UG | 产品价格： | ¥1500.0 |
基本信息
| 原核抗性: | Kan |
|---|---|
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | 大肠杆菌DH5α |
| 培养条件: | LB/37℃ |
质粒图谱
pGPU6-GFP-Neo-IL17AshRNA2阴性对照质粒使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pGPU6-GFP-Neo-IL17AshRNA2阴性对照质粒注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验，双酶切位点Bbs 1和Bamh1 ，构建完后Bbs1酶切位点失活，做不了双酶切；你们有遇到过这种情况吗？吉玛技术部的说他们所有的shRNA都是这样；载体用的是PGPU6/GFP/NEO panpan4710 科研穷三代，吉玛毁一生啊~~~ damao113098 楼上的兄弟幽默了 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微
各位战友： 一下是小妹在Invitrogen公司的siRNA designer设计的shRNA序列，均为小鼠基因，也经过Blast验证，质粒选择的是pGPU6/GFP/neo，酶切位点分别是Bbs 1 和BamH 1，请给位专家给予指导！ Rictor（190-208、845-863）： 1.5-CACCGCTGGGCCATCTGAATAAC-TTCAAGAGA-GTTATTCAGATGGCCCAGC-TTTTTTG-3 3-CGACCCGGTAGACTTATTG
同时进行阳性对照 siRNA 和阴性对照 siRNA 实验。阴性对照实验进行时需要使用与所有基因序列不同的序列（就是说没有 RNAi 效果的序列），阳性对照实验需要使用高效的 RNAi 序列。需要提前确认进行 RNAi 细胞 RNAi 的干扰效果（RNAi 效果的持续性和表达抑制效率）和再次进行独立实验确定重复性。但是 DNA 质粒和合成 siRNA 的转染的最适条件不一样，必须要使用最适合合成 siRNA 的条件。 *可以使用以下三种中其中一种： 市售的对照 siRNA（基因
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