- ¥800 - 1500
- 钦诚生物
- 上海
- QC6874
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
2UG/5UG
| 规格： | 2UG | 产品价格： | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5UG | 产品价格： | ¥1500.0 |
基本信息
| 别名: | NM_001025109.1 |
|---|---|
| 启动子: | 无 |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | 无 |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | LB/37℃ |
| 5'测序引物: | M13R |
| 3'测序引物: | M13F |
质粒图谱
pCR-Blunt II-TOPO-MYRIP(2个同义突变)人源基因模板质粒使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pCR-Blunt II-TOPO-MYRIP(2个同义突变)人源基因模板质粒注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验的PCRMIX，是目前最“傻瓜”的 PCR 反应体系之一，不论是质粒、菌液、CDNA、基因组 DNA、或者是直接裂解的粗提物，GC 含量高达 75% 的模板，都能轻松扩增，不需要费力的“摸条件”！ 本产品包含酶、dNTP、特殊稳定剂和优化的反应缓冲液，浓度为 2x。DNA 扩增时，只需加入模板，引物和水，使 MasterMix 溶液的浓度为 1× 即可进行反应。具有快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行 PCR 扩增可以减少操作时间，避免因多步操作带来的污染，特别适宜高通量筛选基因的扩增
浓度不同，两种引物浓度相差 100 倍。在最初 20 各循环中，主要产物是双链 DNA。当低浓度引物被耗尽后，高浓度引物引导的 PCR 就会产生大量单链 DNA，单链 DNA 可用于序列测定。 三、主要试剂 1. DNA 模板（1ng/μL）（质粒 R-pGEX-4T-1，R 指代外源基因） 2. 2.5mmol/LdNTP (TaKaRa) 3. 10×PCR 缓冲液(TaKaRa) 4. 25mmol/L MgCl 2 (TaKaRa) 5. 引物 1、引物 2（5pmol/μL） 引物
的成功取决于很多因素，其反应组分在扩增中起着至关重要的作用。以下总结了在 PCR 反应体系设置中需要考虑的一些重要因素。 【模板 DNA】 DNA 扩增的模板可以是多种来源，如基因组 DNA（gDNA）、互补 DNA（cDNA）和质粒 DNA。DNA 的组成和复杂程度决定了 PCR 扩增的最佳模板起始量。比如，在 50 μL 体系中 0.1-1 ng 质粒 DNA 已经完全足够，但同样体系需要 5-50 ng 的 gDNA。最佳模板起始量同时也取决于所用的 DNA 聚合酶类型，经过基因工程改造
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