- ¥800 - 1500
- 钦诚生物
- 上海
- QC7388
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 供应商：
钦诚生物
- 规格：
2UG/5UG
| 规格： | 2UG | 产品价格： | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5UG | 产品价格： | ¥1500.0 |
基本信息
| 别名: | BC028118.1;MGC40222 |
|---|---|
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 筛选标记: | 无 |
| 克隆菌株: | 大肠杆菌DH5α |
| 培养条件: | LB/37℃ |
质粒图谱
pCMV-SPORT6-C6orf218人源基因模板质粒使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pCMV-SPORT6-C6orf218人源基因模板质粒注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
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文献和实验。（三）核酸分子杂交法制备目的基因特异的核酸探针，通过核酸分子杂交法从众多的转化子中筛选目的克隆。目的基因特异的核酸探针可以是已获得的部分目的基因片段,或目的基因表达蛋白的部分序列反推得到的一群寡聚核苷酸,或其它物种的同源基因。（四）免疫学筛选法获得目的基因表达的蛋白抗体，就可以采用免疫学筛选法获得目的基因克隆。这些抗体即可是从生物本身纯化出目的基因表达蛋白抗体，也可从目的基因部分ORF片段克隆在表达载体中获得表达蛋白的抗体。上述方法获得的阳性克隆最后要进行测序分析，以最终确认目的基因。
发表[1，2，3]。国内针对外源基因在原核细胞中高效表达的关键因素，构建了高效表达载体[4]，并在此基础上成功表达了一系列细胞因子的基因[5，6，7]。我们在分析了国内外有关在原核系统中表达蛋白的实验资料的基础上，对在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略所涉及的内容进行全面的总结，以期有助于我国在这方面的研究。 1.有效表达载体的构型 构建表达质粒需要多种元件，需要仔细考虑它们的组合，以保证最高水平的蛋白质合成。E.coli 表达载体的基本结构[8]。 启动子(以杂和的tac 启动子为例
与之序列相应的单个内源基因的mRNA，但是dsRNA小片断如小于21~23nt，特异性将显著降低；3）靶mRNA的降解过程需要一系列结构和功能特异的蛋白；4）沉默效率高，相对少量的dsRNA就可以抑制基因表达，使表型达到缺失突变；5）稳定性好，shRNA表达的RNAi具有稳定的特点，不仅可用在哺乳动物细胞上，还可用在整个动物上的基因功能进行深层次的研究。2002年KAY[219]研究小组将体外合成的针对荧光素酶的siRNA和表达对荧光素酶的质粒同时转染成年小鼠的肝脏，成功观察到荧光素酶的表达受到特异
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