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Western Blot (蛋白印迹)

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  • 蛋白免疫印迹,是检测目的蛋白常用而且重要的方法之一。基本原理是通过将电泳分离后的细胞或组织总蛋白从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原,最后通过分析底物化学发光(ECL)显色底片上曝光的位置和深度获得特定蛋白在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
  • 北京
  • 2025年07月15日
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      Western Blot (蛋白印迹)

    Western Blot (蛋白印迹)
    Western Blot(蛋白印迹)简介
           Western blot,也称Western、Western blotting、Western印迹、蛋白免疫印迹,是检测目的蛋白常用而且重要的方法之一。基本原理是通过将电泳分离后的细胞或组织总蛋白从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原,最后通过分析底物化学发光(ECL)显色底片上曝光的位置和深度获得特定蛋白在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
           Western Blot是的一种常用的蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面,具有高分辨率和固相免疫测定的高特异性和敏感性,常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。  
     

     
    试验流程
    1、细胞蛋白提取和定量。
    2、10-15%的SDS-PAGE变性聚****凝胶电泳。
    3、蛋白转膜(PVDF膜)。
    4、蛋白封闭 (5%脱脂奶粉)。
    5、一抗孵育。
    6、二抗孵育。
    7、暗室显色(ECL),洗片等。

    8、数据分析。
     
    实验结果示例

    客户提供
    1、实验信息,包括抗体类型,蛋白分子质量和性质等。如果需要培养细胞,并进行药物处理,需要提供细胞类型和化合物。
    2、实验结果要求等。 
     
    我们的优势
    1、多种抗体供实验需要。
    2、专业的操作人员。
    3、高规格实验室。
    4、数据结果交付周期快。
      
    服务流程
    1、提交项目课题相关需求和资料。
    2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。
    3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。
    4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。
    5、开展实验,按期完成合同规定的内容。
    6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。
     
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    • 【求助】western blot

      llh刘丽华 请教高手我最近做western blot,结果总是不理想,目的条带总是很淡,上样量已经是60ug了,封闭用的是5%脱脂奶粉,我还应该怎么改进哦?下面是我的结果,采用的是ECL化学发光,凝胶成像系统拍照,下面一条是我的目的条带。 麻烦各位帮帮忙吧! Mostino 转膜应充分,并提高第一抗体的使用量! 成其瑞 用好点的抗体 volano

    • 蛋白印迹(Western Blot)常用试剂

      蛋白印迹(Western Blot) 常用试剂 >>>蛋白抽提 货号 品名 规格 价格 备注 WB003 组织蛋白抽提试剂

    • 【讨论】western blot 的疑问

      anlise 刚做的western,跑分离胶时发现mark的条带被拖长了,原来的线性条带变成了长方形。 考虑哪些方面的原因呢? selleckchemcials 1. 可能是电流太强了, 可以考虑把电压调低一点~ 2. 分离胶浓度有点低,可以考虑把换成高浓度的胶~ 做实验的时候,为了得到漂亮的图,一定不要介意多花时间~我有的时候为了让条带好看,170KD的蛋白都用12%的胶,跑上3小时呢~

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