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细胞详述
少突胶质细胞是中枢神经系统中胶质细胞的重要组成部分,其主要功能是包绕神经元的轴突形成髓鞘,协助神经电型号的跳跃式高效传递,维持和保护神经元的正常功能。此外,少突胶质细胞还具有合成和分泌多种细胞因子来促进神经元、神经胶质细胞的发育和存活等功能。
细胞特性
1) 组织来源于人的正常脑组织。
2) 细胞鉴定:MBP免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:圆形或椭圆形细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验在银浸染标本中,少突胶质细胞比星状胶质细胞小,其突起也较小而少,呈串珠状,故被称之为少突胶质细胞,但是现在用特异性免疫细胞化学染色显示的少突胶质细胞,其突起并不少,而且还有许多分支。根据少突胶质细胞的分布和位置可分为三种: ① 束间少突胶质细胞 (interfasicular oligodendrocyte) ,分布在中枢神经系统的白质的神经纤维束之间,成行排列,在胎儿和新生儿时期含量较多,而在髓鞘形成过程中迅速减少
少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Ham’s F-12培养液中,移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230μm和104μm尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0×105 cells/cm2浓度将细胞接种于培养皿中,将培养皿维持在37°C,5%CO2潮湿环境中。3天后更换培养基,以后每两天更换一次。9-11天后细胞能够铺满培养皿。少突胶质细胞祖代生长在星形
学观察结果组织块24h开始贴壁,48~72h可见神经组织边缘游出少量细胞,主要为圆形或梭形。8~9d左右,细胞基本铺满培养孔。此时改用无血清条件培养基培养进行纯化。培养过程中,部分细胞死亡。12d左右获得的细胞胞体基本为呈圆形或多角型,直径约6~10μm。细胞核较大,胞质少。2.2 免疫组织化学染色结果培养的视神经少突胶质细胞的免疫组织化学染色GC蛋白阳性,未加一抗的呈阴性。染色结果显示成熟的少突胶质细胞突起丰富,互相形成蜘蛛网状。苏木素复染,异质细胞较少,90%以上为阳性细胞。3.讨论抑制神经
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